Padronização da porosidade de géis de poliacrilamida (SDS-PAGE), para proteinograma de soro sanguíneo e soro lácteo utilizando-se o sistema de eletroforese descontínua (DISC-ELETROFORESE).

• Processo: 09/03075-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: José Jurandir Fagliari
• Beneficiário: Fernanda de Campos Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Eletroforese Eletroforese de proteínas Gel (formas farmacêuticas) Patologia clínica veterinária
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eletroforese | Gel | Proteinograma | Soro Lácteo | soro sanguíneo | Patologia Clínica Veterinária

Resumo

A eletroforese visa à separação de moléculas em função de suas cargas elétricas, de seus pesos moleculares e de suas conformações em suportes porosos e tampões apropriados, sob a influência de um campo elétrico contínuo, sendo que a separação eletroforética de proteínas depende da porosidade do gel. Porém, um dos maiores problemas encontrados durante o preparo dos géis, é a padronização do tamanho médio dos poros para cada tipo de amostra, sendo este, portanto, um fator limitante para a utilização da técnica de eletroforese em gel de acrilamida contedo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) na separação de cadeias polipeptídicas. A relação entre acrilamida e bis-acrilamida determina as propriedades físicas do gel e, assim propiciam subsídios para a separação das proteínas neste tipo de gel. O objetivo deste estudo é padronizar a porosidade de géis de poliacrilamida para a elaboração de proteinogramas de soro sanguíneo e de soro lácteo, utilizando-se o sistema de eletroforese descontínua (DISC-ELETROFORESE), com base nos padrões de proteínas purificadas. Para isso, serão utilizadas amostras únicas de soro sanguíneo das espécies bovina, caprina, suína, equina, canina e felina, bem como amostras de soro lácteo, inclusive de secreção colostral, de vacas e cabras e serão preparados géis nas concentrações de T=8, 10 e 12% (concentração total dos componentes acrílicos, acrilamida + bis-acrilamida) e C nas concentrações 1,33, 1,87, 2,4, 2,67 e 3,20% (relação em peso, entre a concentração de bis-acrilamida e a soma dos componentes acrílicos).