Expressao, cristalizacao e resolucao da estrutura de enzimas digestivas de insetos.

• Processo: 02/10016-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Walter Ribeiro Terra
• Beneficiário: Plinio Tadeu Cristofoletti Junior
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão de proteínas Insetos Estrutura de proteína Enzimas Cristalografia de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalizacao De Proteinas | Enzimas | Estrutura De Proteina | Expressao De Proteinas | Inseto | Intestino Medio

Resumo

Este projeto insere-se dentro do programa da FAPESP Smolbnet (Rede de Biologia Molecular Estrutural), que visa a resolução de estruturas de proteínas em parceria com o Laboratório de Luz Síncrotron (LNLS). Uma cisteína proteinase de T. molitorfoi expressa com atividade na bactéria Escherichia coli. Outras duas proteases e uma aminopeptidase já foram clonadas e serão expressas em bactéria. Outras glicosidases selecionadas poderão ser clonadas, seqüenciadas e expressas nos mesmos moldes realizados para outras enzimas. Caso a expressão em bactéria não seja bem sucedida tentar-se-á sua expressão na levedura Pichia pastoris. Proteínas purificadas na ordem de 10 mg serão submetidas a ensaios de cristalização. Se a cristalização de algumas das proteínas for possível, obtendo-se cristais com boa difração, será realizada a coleta de dados na fonte de luz Síncrotron. Seguir-se-á a resolução da estrutura da proteína de interesse. (AU)