Relevância funcional de novos haplótipos da sintase endotelial do óxido nítrico (eNOS) sobre a biodisponibilidade de óxido nítrico (NO) em negros

• Processo: 09/07507-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Jose Eduardo Tanus dos Santos
• Beneficiário: Ingrid Ferreira Metzger
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Farmacologia Polimorfismo genético Nitritos Óxido nítrico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: haplótipo | Nitrito | Oxido Nitrico | Polimorfismo | sintase endotelial do oxido nitrico | tagSNP | Farmacologia

Resumo

O óxido nítrico (NO) desempenha um importante papel no aparelho cardiovascular e alterações na biodisponibilidade do NO contribuem para o desenvolvimento de doenças como hipertensão arterial, aterosclerose e doença coronariana. O gene da óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) apresenta polimorfismos genéticos que têm sido associados com alterações em sua expressão e/ou atividade. Combinações de marcadores genéticos (haplótipos) do gene da eNOS foram associadas a variações de biodisponibilidade de NO em indivíduos brancos. Entretanto, existem diferenças nas frequências haplotípicas entre indivíduos brancos e negros. O estudo de "tagSNPs" é uma forma mais eficiente de representar a informação de outros SNPs em uma região genômica com alto desequilíbrio de ligação. No presente projeto aumentaremos o conhecimento da estrutura haplotípica do gene da eNOS e estudaremos seis tagSNPs (rs2070744, rs1799983, rs3918226, rs3918188, rs743506 e rs7830) e um VNTR (variable number of tandem repeats) no intron 4 que, em conjunto, representam 45% dos blocos de haplótipos existentes no gene da eNOS. Portanto nosso objetivo é investigar como os novos haplótipos, formados por esses sete polimorfismos, podem influenciar a biodisponibilidade de NO (altas e baixas concentrações de nitrito) em indivíduos da raça negra. Estudaremos 200 voluntários saudáveis (homens, negros, não fumantes, 18-60 anos de idade e que não estejam tomando medicamentos). As genotipagens para os tagSNPs (rs2070744, rs3918226, rs1799983, rs3918188, rs743506 e rs7830) serão feitas pelo método TaqMan (Taqman® Allele Discrimination assay) e para o Intron 4 (VNTR) por PCR seguido por eletroforese. A formação de NO será determinada através da dosagem de Nitrito (plasma, hemáceas e sangue total) por quimioluminescencia (NO Analyser). As freqüências dos haplótipos serão estimadas com uso do programa PHASE 2.1, e para a visualização do desequilíbrio de ligação entre os polimorfismos será usado o programa "Haploview".