Producao de macroarrays de cdna para validacao de dados de expressao.

• Processo: 02/13944-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Glaucia Mendes Souza
• Beneficiário: Luciana Mantzouranis
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Desenvolvimento Dictyostelium discoideum
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desenvolvimento | Dictyostelium Discoideum | Macroarrays | Resposta A Estresses

Resumo

O ciclo de vida de Dictyostelium discoideum é composto de duas fases Independentes. Durante o crescimento vegetativo, amebas crescem isoladas até que a fonte de nutrientes seja esgotada o que induz a parada do crescimento. A carência nutricional induz a entrada num programa de desenvolvimento, que inclui a- agregação das células e a formação de um organismo multicelular. A proteína quinase YakA é responsável pela indução da parada do crescimento, ativação do processo de desenvolvimento e regulação da resposta a estresses nitrosoativo e oxidativo. Com o objetivo de identificarmos genes regulados por esta quinase isolamos outros componentes da via regulada pela YakA e iniciamos um projeto de análise em larga escala do padrão de expressão utilizando chips de DNA. Cerca de 200 genes foram identificados como alterados- em resposta a estresse induzido por óxido nítrico: O presente projeto tem como objetivo a validação dos dados de expressão obtidos para diversos mutantes. Para tal 384 cDNAs foram selecionados os quais serão amplificados, aplicados em membranas de nailon (macroarrays) e hibridizados contra sondas de células tratadas com estresses nitrosoativo, oxidativo e nutricional. (AU)