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Producao de macroarrays de cdna para validacao de dados de expressao.

Processo: 02/13944-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de agosto de 2003
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2003
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Glaucia Mendes Souza
Beneficiário:Luciana Mantzouranis
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Desenvolvimento

Resumo

O ciclo de vida de Dictyostelium discoideum é composto de duas fases Independentes. Durante o crescimento vegetativo, amebas crescem isoladas até que a fonte de nutrientes seja esgotada o que induz a parada do crescimento. A carência nutricional induz a entrada num programa de desenvolvimento, que inclui a- agregação das células e a formação de um organismo multicelular. A proteína quinase YakA é responsável pela indução da parada do crescimento, ativação do processo de desenvolvimento e regulação da resposta a estresses nitrosoativo e oxidativo. Com o objetivo de identificarmos genes regulados por esta quinase isolamos outros componentes da via regulada pela YakA e iniciamos um projeto de análise em larga escala do padrão de expressão utilizando chips de DNA. Cerca de 200 genes foram identificados como alterados- em resposta a estresse induzido por óxido nítrico: O presente projeto tem como objetivo a validação dos dados de expressão obtidos para diversos mutantes. Para tal 384 cDNAs foram selecionados os quais serão amplificados, aplicados em membranas de nailon (macroarrays) e hibridizados contra sondas de células tratadas com estresses nitrosoativo, oxidativo e nutricional. (AU)