Estudos estruturais e cineticos de trealases intestinal de insetos.

• Processo: 06/51109-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Clelia Ferreira Terra
• Beneficiário: Maria Cicera Pereira da Silva
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/11938-5 - A digestão nos insetos: uma abordagem molecular, celular, fisiológica e evolutiva, AP.TEM
• Assunto(s): Trealase Estrutura tridimensional Mutagênese sítio-dirigida
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estrutura Tridimensional | Grupos Catalicos | Mutacao Sitio Dirigida | Trealase

Resumo

Devido à importância da trelase em fungos, nematóides e insetos e a inexistência de dados sobre a estrutura e grupos catalícos de nenhuma trealase de nenhuma fonte, o projeto visa, principalmente a determinação desses grupos por mutação sítio dirigida e cristalização da enzima para resolver a estrutura tridimensional. Esse projeto parece viável, uma vez que temos uma tealase expressa em sistema que utiliza bactérias com um rendimento de 20mg de enzima pura por litro de meio de cultura. Essa enzima apresenta a mesma atividade específica daquela purificada do animal. Como esses experimentos tem algumas esperas, paralelamente pretendemos terminar o seqüenciamento da trealase ligada à membrana e talvez clonar seu c-DNA e expressá-la e caracterizá-la, uma vez que nenhuma trealase de insetos ligada à membrana foi caracterizada. Também pretendemos produzir anticorpos contra a enzima recombinante para verificar em quais órgãos desse e de outros insetos de outras ordens a trealase é reconhecida e imunocitolocalizá-la. (AU)