Estudo da regulacao transcricional de genes codificando celulases de trichoderma reesei com base em um sistema heterologo empregando saccharomyces cerevisiae.

• Processo: 94/06164-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1995
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 1996
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira
• Beneficiário: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 92/03558-4 - Mecanismos regulatórios da expressão gênica em eucariotos: genes das celulases de Trichoderma reesei e das prolaminas de cereais, AP.TEM
• Assunto(s): Celulase Trichoderma reesei
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulases | Interacao Proteina-Dna | Regulacao Heterologa | Saccaromyces Cerevisiae | Trichoderma Reesei

Resumo

O sistema enzimático de celulases do fungo filamentoso Trichoderma reesei tem sido intensivamente investigado. Esse organismo apresenta-se altamente favorável para o desenvolvimento de processos biotecnológicos, tanto com vistas à conversão de celulose como à produção de peptídeos heteólogos. O presente trabalho tenciona investigar a regulação de genes para enzimas celulolíticas em Saccharomyces cerevisiae, um excelente organismo experimental. A metodologia baseia-se na expressão de fusões entre os promotores dos genes mencionados e lacZ, um gene repórter. A clonagem de reguladores é um objetivo primordial, e será tentada pela transformação de linhagens de leveduras trazendo os genes híbridos com um banco de cDNA de T. reesei. Clones positivos devem ser identificados a partir de variações na expressão das fusões gênicas, verificáveis em placas. Por esse procedimento, busca-se aproveitar o alto grau de conservação que os sistemas de regulação apresentam entre organismos eucariotos para contornar as limitações apresentadas por T. reesei no emprego de técnicas de biologia molecular. Paralelamente a esse trabalho, a interação de elementos reguladores cis com proteínas presentes em extrato proteico de T. reesei será examinada. (AU)