Inativação do gene RcaA que confere resistência a camptothecin em Aspergillus nidulans

• Processo: 00/06340-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2000
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gustavo Henrique Goldman
• Beneficiário: Marcia Regina von Zeska Kress
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Aspergillus nidulans Camptotecina DNA topoisomerases tipo I Quimioterápicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus Nidulans | Camptothecin | Nibrina | Quebra Da Dupla Fita De Dna | Topoisomerase I | Xrs2

Resumo

A Camptothecin é um agente quimioterápico utilizado contra células cancerígenas. Ela se liga reversivelmente ao complexo intermediário covalente DNA-topoisomerase I tornando-o estável, o que interfere com a progressão da forquilha de replicação. Isto, por sua vez, causa o acúmulo de quebras na dupla fita de DNA e dispara diversas resposta celulares como a apoptose. O fungo Aspergillus nidulans foi utilizado como um sistema modelo para a obtenção de maiores informações acerca dos mecanismos de resistência desta droga em células eucarióticas. Em um "screening" para a obtenção de mutantes sensíveis a camptothecin o mutante sca299 foi isolado, e a partir deste, através de complementações por transformações, o gene rcaA. Análise da sequência do gene rcaA, sugere que se trata de um análogo funcional do gene humano NBS1 ou Nibrina, que é o gene defeituoso na Síndrome de Nijmegen, uma doença rara autossômica, recessiva, com penetrância completa. Neste projeto propomos: (i) a obtenção de mutantes com rompimento ou deleção do gene rcaA; (ii) a análise da seqüência do gene rcaA mutado em sca229, objetivando verificar a natureza da mutação que causa o fenótipo deste mutante. (AU)