Identificacao dos grupos presentes no sitio ativo e caracterizacao estrutural da trealase de tenebrio molitor.

• Processo: 02/07431-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Clelia Ferreira Terra
• Beneficiário: Ana Gilhema Gomez Duran
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/10458-2 - A digestão nos insetos: uma abordagem molecular, celular, fisiológica e evolutiva, AP.TEM
• Assunto(s): Trealase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Digestao Em Insetos | Trealase

Resumo

Trealase é uma enzima muito importante no metabolismo dos insetos, pois trealose é o principal açúcar circulante nesse organismos. As trealases em geral foram pouco estudadas. Na família das glicosil hidrolases a que pertencem as trealases não há nenhuma enzima cujos grupos envolvidos em catálise ou estrutura tridimenctonal tenha sido determinada. Nós pretendemos isolar, caracterizar os grupos presentes no sítio ativo (usando modificadores de grupos presentes em radicais de aminoácidos) e a arquitetura do sítio ativo (através de inibições e inibições múltiplas). Pretendemos clonar e seqüênciar o cDNA que codifica a enzima e expressá-la. Ela deverá ser cristalizada para determinação da estrutura terciária. Os grupos envolvidos em catálise deverão ser determinados reagindo a enzima com modificadores e hidrolisando-a em peptídeos que serão separados e seqüenciados. Caso haja tempo os aminoácidos envolvidos em catálise serão confirmados por mutação sítio-digida e a absorção de beta-glicosídeos tóxicos vegetais e de seus aglicones (que são inibidores de trealases presentes em vários tecidos) será verificada, determinando-se quais tecidos eles atingem. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

DURAN, Ana Gilhema Gomez. Caracterização da trealase intestinal da larva Tenebrio molitor e clonagem do cDNA que a codifica. 2005. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.