Clonagem de embrioes bovinos: uso de blastomeros e celulas do cumulus como fonte doadora de nucleos.

• Processo: 99/07377-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: José Antonio Visintin
• Beneficiário: Marco Roberto Bourg de Mello
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Blastócito Embrião Transferência nuclear Clonagem Bovinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Blastomeros | Bovinos | Clonagem | Cumulus Oophorus | Embrioes | Transferencia Nuclear

Resumo

Este experimento avaliara a eficiência de blastômeros e de células do cumulus oophorus como fonte doadora de núcleos na produção de embriões bovinos geneticamente idênticos (clones). Oócitos oriundos de ovários colhidos em matadouro serão maturados in vitro por 22-24 horas e enucleados mediante a remoção do primeiro corpúsculo polar e da placa metafásica, com auxílio de micropipeta. Após a enucleação, os embriões serão reconstruídos com blastômeros provenientes de mórulas produzidas in vitro e ativados eletricamente (2 pulsos de 1,3KV/cm durante 50us). Já as células do cumulus serão colhidas de novilha da raça nelore com auxílio de ultra-som e, após dispersão em solução de hialuronidade, injetadas no citoplasma dos oócitos enucleados. A ativação será realizada após 0, 2 ou 4 horas da injeção nuclear pela exposição dos embriões reconstruídos à solução contendo 2,5mM de estrôncio por 5 minutos. Os embriões reconstruídos serão co-cultivados em células de oviduto bovino em meio TCM-199 por 7 dias. Após determinação das taxas de mórulas e blastocistos, os embriões viáveis serão transferidos para receptoras ou corados para contagem do número de células. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

M.R.B. MELLO; H.V.A. CAETANO; M.G. MARQUES; M.S. PADILHA; J.F. GARCIA; M.P. MILAZZOTTO; M.E.O.A. ASSUMPÇÃO; A.S. LIMA; A.C. NICÁCIO; C.M. MENDES; et al. Production of a cloned calf from a fetal fibroblast cell line. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, v. 36, n. 11, p. 1485-1489, 2003-11-00. (99/07377-3)

BOURG DE MELLO, MARCO ROBERTO; AMARAL CAETANO, HELOISA VASCONCELLOS; MARQUES, MARIANA GROKE; MILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; NICACIO, ALESSANDRA CORALLO; MENDES, CAMILLA MOTA; OLIVEIRA, VIVIANE PURRI; D'AVILA ASSUMPCAO, ELENA ORTIZ; VISINTIN, JOSE ANTONIO. BIRTH OF CLONED CALVES PRODUCED WITH ADULT AND FETAL FIBROBLASTS. Boletim da Indústria Animal, v. 65, n. 3, p. 7-pg., 2008-01-01. (99/07377-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MELLO, Marco Roberto Bourg de. Clonagem em bovinos: uso de fibroblastos fetal e adulto como fonte doadora de núcleo. 2003. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.