Estudo da resposta imune a tropomiosina recombinante de "periplaneta americana" (alergeno per a 7) em pacientes com asma e/ou rinite.

• Processo: 00/13329-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Luisa Karla de Paula Arruda
• Beneficiário: Ana Beatriz Rossetti Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Tropomiosina Imunoglobulina E Asma Baratas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alergenos Recombinantes | Asma | Baratas | Ige | Tropomiosina

Resumo

Relatamos que 55% das crianças com asma e/ou rinite alérgica, vivendo em Ribeirão Preto e São Paulo apresentaram testes cutâneos positivos para extratos de B. germanica e/ou P. americana. Uma biblioteca de cDNA de P. americana foi rastreada, utilizando IgE do soro de crianças asmáticas, alérgicas a barata e uma proteína com alto grau de homologia coro tropomiosina foi identificada. Tropomiosina de barata (Per a 7) mostrou 80-82% de identidade de seqüência com tropomiosina de ácaros (D.pteronyssinus e D. farinae) e camarão. Per a 7 recombinante será expressada em Pichia pastoris. O DNA de Per a 7 amplificado por PCR foi subclonado no vetor pPIC9 e será incorporado a Pichia pastoris por eletroporação. A análise das colônias contendo o gene de interesse será feita por PCR e clones positivos serão utilizados para a expressão da tropomiosina. Tropomiosina recombinante e natural serão purificadas por cromatografia de afinidade, utilizando mAb 1A6, anti tropomiosina de D.pteronyssinus. A atividade biológica da tropomiosina natural e recombinante será comparada por testes cutâneos. Anticorpos IgE anti Per a 7 e Per a1 serão determinados por ELISA, utilizando soro de pacientes alérgicos a barata. Per a 7 recombinante será utilizado para estudar a reatividade cruzada entre baratas e ácaros e para o estudo da resposta de células T em pacientes alérgicos a barata. (AU)