HrcA de Caulobacter crescentus e Xylella fastidiosa: expressão para estudos estruturais e de complementação de mutantes

• Processo: 00/11266-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Suely Lopes Gomes
• Beneficiário: Humberto Rodriguez Perez
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Caulobacter crescentus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caulobacter Crescentus | Estudos De Complementacao | Expressao E Purificaao | Hrca | Quimeras | Xyllela Fastidiosa

Resumo

Caulobacter crescentus é um modelo bacteriano adequado para o estudo de fenômenos que ocorrem durante o ciclo celular. Um destes fenômenos é a variação na expressão de certos genes nas diferentes fases do ciclo. Em C. crescentus encontram-se entre tais genes os do operon groESL, que codifica as chaperoninas GroES e GroEL, cuja expressão é reprimida por uma proteína denominada HrcA, produto do gene hrcA que, por sua vez, é expresso constitutivamente. O gene hrcA está presente em muitas bactérias, entre elas Xylella fastidiosa. A proteína HrcA de C. crescentus é a que exibe a mais alta identidade com a HrcA de X. fastidiosa, dentre as proteínas de sequências conhecidas. No intuito de obter informações sobre os mecanismos que modulam a atividade de HrcA em C. crescentus, este projeto objetiva: a expressão em vetor adequado, e purificação, visando estudos estruturais, das proteínas HrcA de C. crescentus e de X. fastidiosa; o estudo da complementação de mutantes nulos para hrcA de C. crescentus, com o gene hrcA de X. fastidiosa, ou com genes "quiméricos" compostos em parte pelo gene hrcA de C. crescentus, e em parte pelo gene hrcA de X. fastidiosa, para a verificação de efeitos fisiológicos e seleção de proteínas interessantes para estudos estruturais; e o estudo da complementação de mutantes nulos para hrcA de C. crescentus, com versões deste gene deletadas em uma ou ambas extremidades, para obter um mapeamento inicial dos diferentes domínios de HrcA. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PEREZ, Humberto Rodriguez. HrcA de Caulobacter crescentus e Xylella fastidiosa: estudos comparativos de seqüências e desenvolvimento de modelo estrutural. 2002. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.