Construção de biossensor bacteriano para a detecção de hidrocarbonetos aromáticos em água utilizando o gene repórter phoA

• Processo: 02/10069-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: René Peter Schneider
• Beneficiário: Adelaide Muraro Anjo Janizelli
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Técnicas biossensoriais Escherichia coli Genes reporter Hidrocarbonetos aromáticos Água Fosfatase alcalina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biossensor | Fosfatase Alcalina | Gene Reporter | Xyir

Resumo

Este projeto visa construir um biossensor para hidrocarbonetos aromáticos utilizando o gene repórter phoA e desenvolver metodologia de cultivo e aplicação. O biossensor (células de E.coli geneticamente modificadas), quando entra em contato com um hidrocarboneto aromático produz uma coloração amarela. Serão avaliadas diferentes fontes de carbono para desenvolver o meio de cultura definido para cultivo de células. Serão identificados o melhor método de colheita e conservação da célula, visando sempre manter as qualidades fisiológicas do sensor. Serão desenvolvidos protocolos para uso destes sensores na análise de hidrocarbonetos aromáticos em água, solo e ar. O principal critério a ser atendido pelo protocolo é a obtenção de resultados reproduzíveis em amostras ambientais, utilizando o xileno como composto padrão. Serão avaliadas a linearidade das curvas de calibração, reproduzibilidade, limites de detecção do sensor, substâncias reconhecidas pelo mesmo, tempo de prateleira, etc. Os resultados obtidos com o biossensor, serão comparados aos obtidos com cromatografia gasosa. A grande vantagem do biosensor é a análise da amostra no mesmo lugar da amostragem a um custo bastante reduzido aos preços das análises em laboratórios convensionais. (AU)