Uso de b-mercaptoetanol e cisteamina na maturacao "in vitro" de oocitos bovinos. efeitos na glutationa intracelular, desenvolvimento de blastocistos, numero de celulas e apoptose.

• Processo: 00/03620-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2000
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Joaquim Mansano Garcia
• Beneficiário: Karina Beloti Avelino
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/11783-4 - Estudo da função e herança do DNA Mitocondrial (mtDNA) nos bovinos: um modelo animal produzido com o Nelore, AP.TEM
• Assunto(s): Glutationa Embriogênese Maturação in vitro Cisteamina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cisteamina | Desenvolvimento Embrionario | Glutationa | Maturacao In Vitro | Oocitos Bovinos

Resumo

Sabe-se que as condições nas quais oócitos imaturos são cultivados in vitro, alteram o subseqüente desenvolvimento. Poucos experimentos foram voltados para a maturação in vitro e os fatores que nela possam interferir beneficamente para aumentar a produção de embriões. Acredita-se que a glutationa (GSH) atua na maturação citoplasmática e tem um papel importante na proteção celular contra os radicais livres produzidos normalmente pelas células. A utilização de precursores que promovam a sua síntese e o aumento da sua concentração em oócitos maturados concede aos embriões maior capacidade para superar o bloqueio no estádio de 8 a 16 células, onde a elevada produção de radicais de oxigênio reflete em menor taxa de desenvolvimento até blastocistos. Em um primeiro experimento avaliaremos os efeitos de 100 uM de B-mercaptoetanol e/ou 100 uM de cisteamina na presença ou ausência de um inibidor da síntese de GSH, o sulfoximida de butionina (BSO, 5 mM) no meio de maturação, sobre a síntese de glutationa por oócitos bovinos maturados in vitro e in vivo. Complementando o primeiro experimento, avaliaremos num segundo experimento os efeitos dos tratamentos que apresentarem maior e menor concentração de glutationa intracelular por oócito maturado in vitro, sobre o desenvolvimento embrionário até o estádio de blastocisto e a viabilidade, analisando o número de células pela técnica de coloração diferencial do trofectoderma e massa celular interna e taxa de apoptose. (AU)