Análise funcional dos mecanismos reguladores da transcrição e amplificação em pufes de DNA

• Processo: 00/11009-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nadia Monesi
• Beneficiário: Nadia Monesi
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 99/12787-6 - Análise funcional dos mecanismos reguladores da transcrição e amplificação em pufes de DNA, AP.JP
• Assunto(s): Puffs cromossômicos Amplificação de genes Drosophila Mosquitos geneticamente modificados
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Amplificacao Genica | Drosophila Transgenicas | Ecdisona | Pufes De Dna | Sciaridae

Resumo

Os pufes de DNA formados nos cromossomos politênicos da glândula salivar de Sciaridae são sítios de amplificação e intensa atividade transcricional reguladas no desenvolvimento. O presente projeto trata da caracterização dos mecanismos moleculares que regulam estes processos nestas regiões do genoma. O projeto têm dois objetivos gerais. O primeiro objetivo é a caracterização fina do promotor do gene BhC4-1 de B. hygida, cuja regulação tecidual e temporal se mostrou conservada em linhagens transgênicas de Drosophila (Monesi et al., 1998). Esta parte do projeto envolve o estabelecimento de novas linhagens transgênicas de Drosophila, a realização de ensaios funcionais nestas linhagens, bem como a realização de ensaios de retardamento em gel. O segundo objetivo é o estabelecimento de um sistema que permita a identificação de regiões funcionalmente importantes para a amplificação. Duas abordagens são consideradas: a) a análise de linhagens de Drosophila transformadas com um fragmento de 17 kb do pufe de DNA C3 de Rhynchosciara americana, que contém a região de início da replicação utilizada no processo de amplificação; b) ensaios transitórios em núcleos da glândula salivar de B. hygida através da injeção de construções contendo o fragmento de 17 kb do pufe de DNA C3. (AU)