Caracterizacao de alelos adicionais de jazigo: um novo gene de morte celular programada em drosophila melanogaster.

• Processo: 05/53595-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Claudio Roberto Simon
• Beneficiário: Lucas Anhezini de Araujo
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Citoesqueleto Morte celular programada Interferência de RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citoesqueleto | Elemento-P | Forminas | Morte Celular Programada | Rnai

Resumo

Hormônios esteróides regulam fenômenos biológicos distintos incluindo diferenciação e morte celular durante o desenvolvimento dos metazoários. Durante o processo de metamorfose de Drosophila, dois pulsos do hormônio esteróide 20-hidroxiecdisona disparam respostas altamente controladas e cruciais para o desenvolvimento normal do indivíduo. O primeiro pulso estimula a morte celular do intestino larval. O pulso subsequente dispara a morte celular programada (MCP) da glândula salivar larval. A partir de um "screening" de uma coleção de 1475 linhagens "enhancer trap" (elementos-P) foi identificada uma mutação que paralisa a MCP da glândula salivar larval durante o desenvolvimento de Drosophila (fenótipo de persistência de glândulas salivares larvais e letalidade pupal). O gene que flanqueia a inserção do elemento-P foi nomeado Jazigo (jaz) e codifica uma proteína que compartilha alta homologia com as proteínas forminas. Estas participam no remodelamento do citoesqueleto de actína em diferentes processos do desenvolvimento animal. Foram promovidos 14 eventos de excisão imprecisa do elemento-P original (jazigo) objetivando gerar alelos adicionais que propiciariam uma menor análise do gene mutado. Com base em análises preliminares durante minha iniciação científica, identificamos três potenciais alelos adicionais de jazigo, todos apresentando letalidade considerável no período pupal e as maiores penetrancias do fenótipo defectivo. Esses mutantes apresentam impacto sobre a transcrição de jazigo tanto em homozigose como em heteroalelia. Pretendemos efetuar a caracterização genética, morfológica e molecular dos alelos adicionais de jazigo e produzir moscas transgênicas, para ensaios de silenciamento pós-transcricional in vivn (RNA de interferência). (AU)