Efeito 'in vitro' da adição do levonorgestrel sobre a concentração intracelular de calcio em espermatozoides de homens ferteis

Autor(es)

Luciana Helena de Santis

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2006-01-27

Membros da banca

Luis Antonio Violin Dias Pereira; Jose Luiz Donato; Francisco Antonio Techiatti Fazano

• Orientador: Luis Guillermo Bahamondes; Luis Antonio Violin Dias Pereira

Resumo

O espermatozóide é uma célula altamente especializada, uma vez que apresenta diferenciações morfofisiológicas que garantem o sucesso da fecundação. Com o objetivo de adquirir a capacidade de fecundação precisam passar por três processos seqüenciais, maturação epididimária, capacitação e reação acrossômica (RA). A capacitação é um processo que acontece no trato reprodutor feminino e define-se como uma mudança bioquímica na membrana plasmática do espermatozóide, sendo a presença de progesterona e o aumento na concentração intracelular do cálcio ('Ca POT +2¿) eventos característicos e obrigatórios para a posterior RA. O levonogestrel (LNG) é um progestágeno sintético, semelhante a progesterona, o qual tem sido usado como contraceptivo feminino, seja na contracepção de emergência (CE), nas pílulas contraceptivas combinadas ou com o dispositivo intra-uterino (DIU). Entretanto, na literatura não há dados que relacionem a eficácia contraceptiva do lenovogestrel com possíveis efeitos deste hormônio sobre os espermatozóides humanos. Assim, com o objetivo de adicionar dados a respeito do mecanismo de ação contraceptiva do LNG, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de 5 concentrações de LNG, comparáveis as concentrações encontradas no plasma sanguíneo de mulheres, após a ingestão de LNG sob a forma de (CE) com a concentração intracelular do cálcio em espermatozóides capacitados de homens férteis. Um total de 24 amostras de sêmen, provenientes de 4 homens férteis foram avaliadas. Os espermatozóides foram selecionados através de um gradiente de Percoll, e foram submetidas a um período de capacitação. Às amostras foi adicionado o corante Fura2/AM e a seguir estas foram expostas às concentrações de 8, 10, 14, 1.000 e 10.000 ng/mL de LNG e a dois controles, um positivo e outro negativo, sendo respectivamente a progesterona (32 'mu' M = 11.000 ng/mL) e a meio de cultivo human tubal fluid (HTF). A seguir as amostras foram avaliadas através da espectrofotometria de fluorescência, com exitação de 340 nm e emissão de 510 nm. A taxa de fluorescência foi convertida em medidas de concentração intracelular de cálcio ([('Ca POT 2+¿]i), utilizando a equação de Grynkiewicz et al. (1985), a qual demonstrou que as concentrações de 8, 10, 14 e 1.000 ng/mL de LNG foram capazes de induzir um aumento na [('Ca POT 2+¿]i significativamente maior quando comparados ao obtido com HTF, e significativamente menor que ao obtido com progesterona (o indutor natural), excetuando-se a concentração de 10.000 ng/ml (32 'mu' M) de LNG, a qual foi estatisticamente similar que a progesterona 11.000 ng/ml (32 'mu' M). Assim, é possível sugerir que o LNG in vitro, em baixas concentrações, aumente a [('Ca POT 2+¿]i nos espermatozóides. No entanto, este mecanismo, de maneira isolada, não deva ser o responsável pela indução da RA. Entretanto a [('Ca POT 2+¿]i obtida através de altas concentrações de LNG (10.000 ng/ml) pode ser sim, um possível mecanismo de ação do LNG como droga contraceptiva (AU)

• Processo FAPESP: 02/12501-0 - Efeito da adição levonorgestrel sobre o influxo de cálcio em espermatozóides de homens férteis
• Beneficiário: Luciana Helena de Santis
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado