Identificação do gênero e espécies de Cryptosporidium em cães e gatos

Autor(es)

Camila Guariz Homem

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Araçatuba. 2016-12-02.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária. Araçatuba
• Data de defesa: 2016-10-13
• Orientador: Marcelo Vasconcelos Meireles

Resumo

O presente trabalho objetivou a identificação e caracterização molecular de isolados de Cryptosporidium em amostras fecais de cães e gatos, bem como o desenvolvimento de uma reação em cadeia pela polimerase (PCR) em tempo real para detecção específica de Cryptosporidium canis em amostras fecais de cães. Trezentas amostras fecais de gatos e 367 amostras fecais de cães foram colhidas nas cidades de Araçatuba e Jaboticabal (SP) e submetidas aos processos de purificação e extração de DNA. “Nested” PCR (nPCR) para o gene 18S do rRNA foi realizada para identificação de Cryptosporidium spp., seguido de seqüenciamento dos fragmentos amplificados. Uma reação de PCR em tempo real para um fragmento parcial do gene HSP70 foi padronizada para a detecção de Cryptosporidium canis em amostras fecais de cães. A positividade para Cryptosporidium spp. pela nPCR em amostras de gatos foi de 11,33% (34/300), e em amostras cães foi de 10,4% (38/367). A PCR em tempo real resultou em 15,3% (58/367) de amostras positivas para C. canis. Foi possível a identificação por meio de seqüenciamento de três amostras positivas para C. felis e seis amostras positivas para C. canis. Foi observada uma maior positividade em filhotes quando comparados a cães adultos. A sensibilidade analítica da PCR em tempo real foi de uma cópia de DNA de C. canis por reação e não foi observada amplificação inespecífica de DNA de outras espécies de Cryptosporidium. Conclui-se que cães e gatos das regiões estudadas podem se apresentar infectados por espécies zoonóticas de Cryptosporidium e a PCR em tempo real desenvolvida neste trabalho é um método sensível e específico para a detecção de C. canis em amostras fecais de cães. (AU)

• Processo FAPESP: 11/09614-6 - Diagnóstico de criptosporidiose em cães e gatos por meio da reação em cadeia de polimerase em tempo real
• Beneficiário: Camila Guariz Homem
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado