A análise metabolômica visa identificar e quantificar os metabólitos produzidos por organismos, mostrando ser uma ferramenta útil na elucidação dos produtos finais de um sistema biológico. Dentre as várias técnicas atualmente empregadas, a cromatografia líquida de ultra-alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS) tem se destacado, mostrando ser uma técnica robusta para análise de metabólitos, pois possibilita alto grau de reprodutibilidade, pouco consumo de solventes e curto tempo de análise. Quando acoplada a um espectrômetro de massas de alta resolução, o campo de aplicações é consideravelmente ampliado, possibilitando seu emprego em diferentes segmentos analíticos. A metabolômica pode ser dividida basicamente em dois ramos: untargeted ¿ destinada à procura do maior número de compostos em uma amostra, sem alvos específicos; ou targeted ¿ quando se conhece a identidade de um metabólito (ou grupo) específico e visa seu monitoramento na amostra. Direcionados por estes conceitos, aqui nós propomos o estudo do metaboloma de uma importante planta de interesse comercial ¿ o eucalipto ¿ dividido em duas partes. A primeira parte dessa tese se destina aos resultados obtidos através de análises untargeted, realizadas durante o período de estágio na Universidade de Wageningen ¿ Holanda, onde foi possível identificar possíveis biomarcadores das espécies analisadas. A segunda parte aborda análises targeted, que compreendem o desenvolvimento e validação de métodos analíticos para quantificação de metabólitos primários e secundários. Dentro desse contexto, foram criados métodos para determinação da razão S/G (siringil/guaiacil) em ligninas, análise do ácido abscísico e seus derivados, análise de amino ácidos, açúcares, ácidos orgânicos e compostos fenólicos. Além disso, foi empregado planejamento fatorial para otimização das condições de extração. Os métodos mostraram-se adequados para quantificação de metabólitos em caules e folhas de eucalipto. Salientamos que os métodos desenvolvidos aqui não são restritos ao eucalipto, podendo ser aplicados em outras matrizes vegetais (AU) |
