Caracterização do papel do gene TCP20 durante o desenvolvimento reprodutivo em Arabidopsis thaliana (L.)

Autor(es)

Natália Moraes Silva

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2015-03-17

Membros da banca

Marcelo Carnier Dornelas; Claudia Regina Baptista Haddad; Adriana Pinheiro Martinelli

• Orientador: Marcelo Carnier Dornelas

Resumo

A família TCP de fatores de transcrição é específica de plantas; os genes dessa família são caracterizados pela presença do domínio TCP, responsável pela ligação ao DNA, e são divididos em duas classes (Classe I e Classe II) com atuação presumidamente antagônica no controle da proliferação celular. TCP20 é um gene da classe I, que pode atuar conjuntamente com TCP8 e TCP9 no controle do ciclo celular e no crescimento da planta. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar fenotipicamente o desenvolvimento reprodutivo dos mutantes simples e duplos para esses genes e determinar o padrão de expressão de TCP20 durante o desenvolvimento floral em Arabidopsis thaliana. Com experimentos de RT-PCR foi possível detectar a presença de transcritos de TCP8, TCP9 e TCP20 em raiz, folhas, inflorescências, flores e frutos de A. thaliana. A análise temporal e espacial da expressão do gene TCP20, mostrou a presença desses transcritos de forma concentrada nos meristemas florais e domos dos primórdios de órgãos florais. A expressão tornou-se mais apical em sépalas e pétalas ao longo do desenvolvimento, e nos órgãos férteis tornou-se mais concentrada na região de formação dos grãos de pólen e óvulos, e na papila estigmática. Foram feitos experimentos de hibridização in situ com os genes TCP8 e TCP9, e estes apresentaram padrão de expressão temporal parecido com TCP20, desligando-se quase completamente ao final da maturação floral. TCP8 apresentou expressão concentrada em algumas células e ausente em outras da mesma região, indicando um padrão de expressão `salt-and-pepper¿ principalmente no início do desenvolvimento dos órgãos florais. A análise de morfometria geométrica indicou algumas variações nas flores de indivíduos mutantes, que incluem principalmente modificações no eixo radial e em porções apicais de sépalas, pétalas e pistilos. A análise de morfometria linear apontou que as sépalas do duplo mutante tcp9tcp20 foram estatisticamente menores que as do genótipo selvagem (p<0,05). O gineceu dos mutantes simples para os três genes, mostraram ovários menores do que os de genótipo selvagem (p<0,05). As análises de áreas celulares da epiderme das pétalas mostraram que não existem modificações nas áreas dessas células nos indivíduos mutantes. A análise das giant cells em sépalas mostrou que não existem diferenças entre as áreas médias dessas células em sépalas de indivíduos mutantes, porém os mutantes tcp8 e duplo tcp8tcp20 mostraram área de cobertura total dessas células menor do que em sépalas de flores selvagens. Os resultados obtidos indicam que esses genes atuam em conjunto controlando os processos responsáveis pela formação e desenvolvimento dos órgãos florais, através do controle dos ciclos de divisão e endoreduplicação (AU)

• Processo FAPESP: 12/23376-3 - Caracterização do papel do gene TCP20 durante o desenvolvimento reprodutivo em Arabidopsis thaliana
• Beneficiário: Natália Moraes Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado