Texto completo
| |
| Autor(es): |
Daniela De Lucena Pedroso
Número total de Autores: 1
|
| Tipo de documento: | Dissertação de Mestrado |
| Imprenta: | São Paulo. |
| Instituição: | Universidade de São Paulo (USP). Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH) |
| Data de defesa: | 2020-07-08 |
| Membros da banca: |
Felipe Santiago Chambergo Chambergo Alcalde;
Andrezza Justino Gozzo Andreotti;
Sirlene Maria da Costa;
Roberto Kopke Salinas
|
| Orientador: | Felipe Santiago Chambergo Alcalde |
| Resumo | |
A demanda por fontes renováveis de energia tem incentivado a pesquisa sobre a utilização da biomassa lignocelulósica como matéria prima para a produção de bioetanol 2G, tornando, assim, interessante o estudo e identificação das enzimas envolvidas na sua degradação. A presente dissertação tem como objetivo identificar a cepa BBF-245, produzir, purificar e caracterizar enzimas oxidorredutases principalmente lacases do fungo Pestalotiopsis sp. (BBF-245) a fim de avaliar a potencial utilização dessas proteínas na degradação do bagaço da cana-de-açúcar e em outras aplicações biotecnológicas. Durante o estudo foi realizada a identificação da cepa BBF-245 (como Pestalotiopsis sp) e a análise da produção de oxidorredutases pelo fungo no cultivo em meio MBC com 1% de bagaço da cana-de-açúcar, encontrando-se uma maior produção de enzimas lacases (2.006,7 U/mg) do que manganês peroxidases (16,42 U/mg) e lignina peroxidases (106,25 U/mg); esses resultados levaram à escolha das lacases para a continuação das seguintes etapas do trabalho. O sobrenadante do 4° dia em MBC com 1% de bagaço da canade- açúcar foi clarificado e concentrado para purificação em cromatografia de troca iônica, na qual foram obtidas duas lacases (PspLac1 e PspLac2) na eluição a 25mM e 50mM de NaCl, respectivamente. As duas enzimas foram, então, caracterizadas quanto à massa molecular aproximada (PspLac1 = 66,7 kDa e PspLac2 = 56,3 kDa), pH ótimo (PspLac1 = 3 e PspLac2 = 4), estabilidade térmica (20-60°C, ambas), Km (PspLac1 = 15,72mM e PspLac2 = 6,42mM), kcat (PspLac1 = 18x102 s-1 e PspLac2 = 5x102 s-1) e kcat.Km-1 (PspLac1 = 1,14x102 s-1.mM-1 e PspLac2 = 7,7x10 s-1.mM-1). O presente trabalho permitiu a identificação do BBF-245 como Pestalotiopsis sp. e a caracterização de duas lacases nativas (PspLac1 e PspLac2), as quais podem ser utilizadas em várias aplicações biotecnológicas, como na composição de coquetéis enzimáticos para a degradação de biomassa (AU) | |
| Processo FAPESP: | 17/25599-3 - Enzimas oxidorredutases do fungo Pestalotiopsis SP |
| Beneficiário: | Daniela de Lucena Pedroso |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Mestrado |