Potenciais biomarcadores de fertilidade e produção espermática de garanhões tratados com análogo de gnrh (lecirelina)

Autor(es)

Thaís Mendes Sanches Cavalero

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Botucatu. 2023-06-13.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Botucatu
• Data de defesa: 2023-05-31
• Orientador: Frederico Ozanam Papa

Resumo

O uso de biotecnologias aplicadas ao sêmen é pouco eficaz em processos que reduzem drasticamente a produção espermática, como a senilidade e disfunções endócrinas. Nesses processos, o uso de GnRH tem ocasionado melhora da quantidade e qualidade espermática em algumas espécies. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia e os efeitos adversos da aplicação de GnRH em garanhões na melhora da qualidade seminal. No experimento 01 foram utilizados garanhões com qualidade espermática normal, divididos em grupo controle (n=3), e tratado (n=4). O grupo tratado recebeu doses diárias de lecirelina (50 µg;im) durante 60 dias, ambos os grupos foram avaliados durante o tratamento e por mais 60 dias após o término do tratamento. Amostras de sêmen e soro sanguíneo foram semanalmente coletadas. No Exp. 02 foram utilizados garanhões subférteis (n=4), com histórico de ≤ 20% de taxa de concepção, baixa qualidade ou produção espermática. Os subférteis foram submetidos ao mesmo tratamento do Exp.01, porém com avaliações quinzenais dos parâmetros espermáticos e hormonais. Em ambos os experimentos a resposta testicular endócrina foi mensurada por dosagem sérica de inibina-B, AMH e sulfato de estrona, determinadas por ELISA; e testosterona por radioimunoensaio. No Exp. 02 também avaliou-se os níveis séricos de FSH e LH por radioimunoensaio. Os parâmetros espermáticos avaliados foram número de espermatozoides totais (NET); cinética espermática pelo sistema CASA (IVOS Version 12 Hamilton Thorne Research, MA, USA): motilidade total e progressiva, número de espermatozoides rápidos; e análise morfofuncional por citometria de fluxo: potencial de membrana mitocondrial, integridade de membrana plasmática e acrossomal, estabilidade de membrana plasmática, peroxidação lipídica e produção de espécies reativas de oxigênio. Os resultados hormonais e espermáticos foram comparados semanalmente com os valores pré-tratamento durante todo o período experimental. Os parâmetros avaliados foram analisados dentro de cada momento pelo teste t (Student) e dentro de cada grupo pela análise de medidas repetidas no tempo (One-way repeated measures). O perfil sérico de AMH, inibina-B e sulfato de estrona não alteraram com o tratamento em nenhum experimento. No Exp.02 não ocorreu redução do FSH, porém o LH diminuiu da semana 1 (P>0.001) até o final do experimento. A testosterona sérica apresentou diferença entre as semanas 6 e 16 (302 vs 977 pg/ml, respectivamente P<0,033) e um garanhão subfértil aumentou o NET em 100% na semana 4. No Exp.01 o NET do grupo tratado aumentou em 50% após 4 semanas de tratamento e se mantiveram elevados até o final da avaliação. A estabilidade de membrana e o potencial de membrana mitocondrial aumentaram uma semana após o início do tratamento (P<0,001) no grupo tratado, retornando aos valores pré-tratamento 60d após o fim da aplicação. Em conclusão, embora o tratamento tenha ocasionado queda da testosterona sérica em alguns animais, outros hormônios indicadores da funcionalidade testicular não foram afetados. Já o aumento da produção espermática, da estabilidade e potencial de membrana mitocondrial demonstram que a terapia com lecirelina pode ser benéfica em determinados casos de subfertilidade. (AU)

• Processo FAPESP: 19/01119-8 - Expressão gênica de biomarcadores de fertilidade, níveis hormonais e produção espermática de garanhões férteis e subférteis tratados com GnRH
• Beneficiário: Thaís Mendes Sanches Cavalero
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado