Caracterização funcional do APC5 em Arabidopsis thaliana

Autor(es)

Luís Felipe Correa da Silva

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALA/BC)
• Data de defesa: 2023-07-06

Membros da banca

Nubia Barbosa Eloy; Maria Helena de Souza Goldman; Adriana Silva Hemerly

• Orientador: Nubia Barbosa Eloy

Resumo

Como organismos multicelulares, as plantas têm seu crescimento e desenvolvimento diretamente dependentes da divisão celular. Esse processo reúne dezenas de reações moleculares que garantem a proliferação celular nos mais variados tecidos vegetais. Nas quatro fases sequenciais que compõem o ciclo celular (S, G1, M e G2), a presença e/ou ausência de diferentes componentes moleculares do programa de divisão celular, como ciclinas, CDKs e securinas, garantem a progressão unidirecional do processo, de forma irreversível. O sistema ubiquitina-proteassoma (UPS) é uma cascata multi-enzimática que direciona substratos específicos para degradação por meio do proteassoma 26S. O Complexo Promotor da Anáfase/Ciclossomo (APC/C) é uma das enzimas responsáveis pelo reconhecimento do substrato a ser ubiquitinado pelo UPS. Em Arabidopsis thaliana, o APC/C possui 14 subunidades. Vários estudos relataram que perturbações nos níveis de expressão de algumas subunidades podem levar a alterações no fenótipo da planta, e comprometer processos como a gametogênese. O processo de divisão celular ocorre em sincronia com os outros processos metabólicos da célula, bem como de toda a planta. Alterações nos nutrientes ou mesmo nas demandas intracelulares podem levar a mudanças na concentração de metabólitos e em suas taxas de conversão, alterando os processos biológicos do organismo. Mudanças metabólicas ocorrem em uma taxa suficientemente rápida para escapar da regulação transcricional, obrigando a célula a usar outras maneiras de regular suas reações para lidar com essas mudanças, como a ação de metabólitos como reguladores. Dessa forma, este projeto tem como objetivo caracterizar funcionalmente o gene APC5 de A. thaliana, bem como investigar as alterações no metabolismo da planta devido a alterações nos níveis de expressão do APC5, possivelmente correlacionando as mudanças com processos já conhecidos que impulsionam o crescimento das plantas. Os resultados mostram que, embora diferenças metabólicas não tenham sido detectadas, a superexpressão do gene APC5 foi capaz de alterar a área total das rosetas de Arabidopsis, tornando-as menores em linhagens transgênicas quando comparadas ao tipo selvagem. Além disso, pode-se detectar que o promotor do gene está ativo nos meristemas apicais da planta, assim como no meristema das raízes laterais. Ensaios com a proteína APC5 fundida ao GFP mostram que ela está localizada no núcleo e no citoplasma. (AU)

• Processo FAPESP: 21/03212-5 - Caracterização funcional da subunidade 5 do Complexo Promotor da Anáfase
• Beneficiário: Luís Felipe Correa da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado