Espectrometria de massas sequencial aplicada no monitoramento da modulação de metabólitos secundários microbianos

Autor(es)

Talita Carla de Tralia Medeiros

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Ribeirão Preto.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (PCARP/BC)
• Data de defesa: 2025-02-07

Membros da banca

Luiz Alberto Beraldo de Moraes; Anelize Bauermeister; Edson Rodrigues Filho; Carla Porto da Silva

• Orientador: Luiz Alberto Beraldo de Moraes

Resumo

Actinobactérias são reconhecidas pela produção de uma diversidade de compostos biologicamente ativos e diversas estratégias têm sido exploradas para modular a produção de metabólitos secundários por esses microrganismos. Este trabalho tem como objetivo investigar a modulação da produção de compostos bioativos por actinobactérias, com ênfase em estratégias para a produção de antibióticos e antifúngicos com atividade contra fitopatógenos. Assim, foi realizada a caracterização morfológica do isolado CAAT 8-25 por MEV e o sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. A diferenciação entre os dois microrganismos foi realizada por fingerprinting MALDI e estudos metabolômicos. Foram identificados cinco compostos majoritários produzidos pelo isolado, responsáveis por sua atividade biológica contra bactérias e fungos fitopatogênicos: oxitetraciclina, herbicidina K, herbicidina F, rimocidina e a aglicona da rimocidina. Para estudar a modulação na produção desses compostos bioativos, foram aplicadas cinco estratégias distintas: OSMAC (cultivo em diferentes meios), adição de metais e terras raras, mix-cultivo, co-cultivo e adição de compostos pró-inflamatórios ao meio de cultivo. Os experimentos foram analisados por espectrometria de massas utilizando diferentes analisadores: triplo quadrupolo, Q-TOF, LTQ e Orbitrap. Adicionalmente, a técnica de molecular network foi empregada como uma ferramenta para a análise e identificação de novos metabolitos e/ou análogos de compostos já conhecidos, oferecendo uma abordagem detalhada da metabolômica. A combinação dessas técnicas, incluindo espectrometria de massas com ionização ambiente e fluxo contínuo, possibilitou uma análise precisa dos compostos. Além disso, a distribuição espacial dos metabólitos foi investigada por DESI-IMS com a técnica de imprint. (AU)

• Processo FAPESP: 18/03782-3 - Espectrometria de massas sequencial aplicada no monitoramento da indução de moléculas bioativas em co-cultivo microbiano
• Beneficiário: Talita Carla de Tralia Medeiros
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto