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Caracterização biologica da enterotoxina citotoxica de Aeromonas hydrophila

Texto completo
Autor(es):
Rosabel Falcon Marquez
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
Imprenta: Campinas, SP.
Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
Data de defesa:
Membros da banca:
Tomomasa Yano; Maria Sumiko Arita; Gleize Villela Carbonell
Orientador: Tomomasa Yano; Marlene Braide Serafim
Resumo

Aeromonas hydrophila vem se tornando um dos mais freqüentes agentes de infeções gastrointestinais. A enterotoxina citotóxica por ela sintetizada é considerada como um de seus principais fatores de virulência. No presente estudo, diferentes procedimentos foram empregados visando purificar e caracterizar biologicamente a enterotoxina citotóxica de Aeromonas hydrophila: A toxina protéica foi precipitada com sulfato de amônio e submetida a processos cromatográficos usando colunas de interações hidrofóbicas (Phenyl Sepharose CL-4B), troca iônica (Q Sepharose Fast Flow e Mono Q) e de exclusão molecular (Superdex 200) no sistema HPLC. O teste de alça ligada de intestino de coelho mostrou a enteropatogenicidade da Ent-ctx. Sua análise em PAGE e SDS-PAGE evidenciou uma banda protéica de peso molecular estimado de 68.000 Da. Ensaios biológicos em diferentes linhagens celulares mostraram uma cinética rápida (2 horas) na indução de efeito citopático. A Ent-ctx induziu alterações morfológicas, tais como vacuolização citoplasmática e condensação cromatínica em células Vero. Alguns dos aspectos morfológicos observados sugerem a indução à apoptose (AU)

Processo FAPESP: 96/01682-0 - Producao de imuno-reagentes para o diagnostico das enterotoxinas citotonica e citotoxica de aeromonas sp.
Beneficiário:Rosabel Falcon Marquez
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado