Caracterização biologica da enterotoxina citotoxica de Aeromonas hydrophila

Autor(es)

Rosabel Falcon Marquez

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 1998-12-18

Membros da banca

Tomomasa Yano; Maria Sumiko Arita; Gleize Villela Carbonell

• Orientador: Tomomasa Yano; Marlene Braide Serafim

Resumo

Aeromonas hydrophila vem se tornando um dos mais freqüentes agentes de infeções gastrointestinais. A enterotoxina citotóxica por ela sintetizada é considerada como um de seus principais fatores de virulência. No presente estudo, diferentes procedimentos foram empregados visando purificar e caracterizar biologicamente a enterotoxina citotóxica de Aeromonas hydrophila: A toxina protéica foi precipitada com sulfato de amônio e submetida a processos cromatográficos usando colunas de interações hidrofóbicas (Phenyl Sepharose CL-4B), troca iônica (Q Sepharose Fast Flow e Mono Q) e de exclusão molecular (Superdex 200) no sistema HPLC. O teste de alça ligada de intestino de coelho mostrou a enteropatogenicidade da Ent-ctx. Sua análise em PAGE e SDS-PAGE evidenciou uma banda protéica de peso molecular estimado de 68.000 Da. Ensaios biológicos em diferentes linhagens celulares mostraram uma cinética rápida (2 horas) na indução de efeito citopático. A Ent-ctx induziu alterações morfológicas, tais como vacuolização citoplasmática e condensação cromatínica em células Vero. Alguns dos aspectos morfológicos observados sugerem a indução à apoptose (AU)

• Processo FAPESP: 96/01682-0 - Producao de imuno-reagentes para o diagnostico das enterotoxinas citotonica e citotoxica de aeromonas sp.
• Beneficiário: Rosabel Falcon Marquez
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado