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Estudo da integracao do dna exogeno em espermatozoides de bovinos.

Processo: 03/07456-8
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2004
Data de Término da vigência: 31 de março de 2006
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
Beneficiário:Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Capacitação espermática  Espermatozoides  Transgenia  Fertilização in vitro  Eletroporação 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Capacitacao Espermatica | Eletroporacao | Espermatozoide | Fecundacao In Vitro | Lipofeccao | Transgenia

Resumo

Os animais transgênicos são ferramentas poderosas para esclarecer processos e sistemas biológicos complexos. Este trabalho terá como objetivo avaliar o uso de espermatozóides como carreadores de DNA exógeno na produção de bovinos transgênicos. O DNA será introduzido nos espermatozóides por capacitação espermática, lipofecção e eletroporação, empregando na primeira etapa o DNA peGFP-N1 e na segunda etapa o DNA do gene bovino da alfa-lactoalbumina. A fecundação in vitro será realizada de acordo com os protocolos convencionais, usando espermatozóides tratados com os diferentes métodos de incorporação de DNA. Os embriões serão avaliados através da fluorescência, na primeira etapa e por PCR na segunda etapa para verificar a presença do inserto. Na segunda etapa, os embriões positivos serão transferidos para receptoras com o objetivo de obter um bovino transgênico. (AU)

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Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
FEITOSA, WEBER BERINGUI; MILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; SIMOES, RENATA; ROVEGNO, MARIANA; NICACIO, ALESSANDRA CORALO; NASCIMENTO, ANIBAL BALLAROTTI; ARRUDA GONCALVES, JOSE SERGIO; VISINTIN, JOSE ANTONIO; ORTIZ D'AVILA ASSUMPCAO, MAYRA ELENA. Bovine sperm cells viability during incubation with or without exogenous DNA. ZYGOTE, v. 17, n. 4, p. 315-320, . (03/10234-7, 03/07456-8)
FEITOSA, WEBER BERINGUI; ILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; MENDES, CAMILLA MOTA; DA ROCHA, ANDRE MONTEIRO; AVANZO, JOSE LUIS; MARTINS, ELIZABETH ANGELICA LEME; VISINTIN, JOSE ANTONIO; ASSUMPCAO, MAYRA ELENA ORTIZ D'AVILA. Exogenous DNA length and quantity affect the transfection rate, but not sperm viability during Sperm-Mediated Gene Transfer. GENE REPORTS, v. 29, p. 7-pg., . (03/10234-7, 03/07456-8)
FEITOSA, W. B.; MENDES, C. M.; MILAZZOTTO, M. P.; ROCHA, A. M.; MARTINS, L. F.; SIMOES, R.; PAULA-LOPES, F. F.; VISINTIN, J. A.; ASSUMPCAO, M. E. O. A.. Exogenous DNA uptake by bovine spermatozoa does not induce DNA fragmentation. Theriogenology, v. 74, n. 4, p. 563-568, . (03/10234-7, 03/07456-8)
ROVEGNO, MARIANA; FEITOSA, WEBER BERINGUI; ROCHA, ANDRE MONTEIRO; MENDES, CAMILLA MOTA; VISINTIN, JOSE ANTONIO; ORTIZ D'AVILA ASSUMPCAO, MAYRA ELENA. Assessment of post-thawed ram sperm viability after incubation with seminal plasma. CELL AND TISSUE BANKING, v. 14, n. 2, p. 333-339, . (03/07456-8, 05/55256-3)
FEITOSA‚ W.B.; DA ROCHA‚ A.M.; MENDES‚ C.M.; PECORA‚ M.. Kinetics of changes in plasma membrane related to apoptosis and necrosis in bovine sperm cells at different incubation times. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 45, n. 5, p. 398-404, . (03/07456-8, 03/10234-7)