Desenvolvimento do fenotipo osteogenico in vitro sobre diferentes nanotopografias de titanio funcionalizadas com o fator de crescimento gdf-5

Resumo

Modificações topográficas e bioquímicas de estruturas de titânio (Ti) permitem o desenvolvimento de novas superfícies de implantes, visando aumentar e/ou acelerar o processo de osteogênese de contato e, conseqüentemente, a osseointegração. O objetivo do presente projeto é avaliar os efeitos de diferentes nanotopografias de Ti funcionalizadas com o fator de crescimento GDF-5 sobre importantes eventos que caracterizam o desenvolvimento do fenótipo osteogenico in vitro. Utilizando modelo de cultura primária de células osteogênicas derivadas de calvárias de ratos recém-nascidos, serão avaliados os seguintes parâmetros: 1) Morfologia celular e estágios de adesão e espraiamento celulares; 2) Molhamento de superfície; 3) Determinação da viabilidade celular, da proporção de células no ciclo celular e do número total de células; 4) Imunolocalização de proteínas da matriz extracelular não-colágena e de integrinas; 5) Análise do grau de diferenciação osteoblástica por reação em cadeia da polimerase em tempo real (real time PCR); 6) Atividade de fosfatase alcalina; 7) Detecção de acúmulos de cálcio / formação de matriz mineralizada. (AU)