Avaliação molecular do efeito de vacina irradiada de toxoplasma gondii na prevenção da formação de cistos teciduais, aborto e eliminação do agente pelo leite, em ratas

Resumo

Este estudo será realizado com o objetivo de avaliar a proteção conferida pela pré-imunização, com vacina constituída de taquizoítos irradiados com raios ³, em ratas wistar, contra desafios orais por diferentes formas infectantes do Toxoplasma gondii. Neste experimento será investigada a proteção vacinal contra formação de cistos cerebrais, cistos na musculatura esquelética, transmissão congênita e eliminação do agente pelo leite. A vacina será administrada por via oral, com uso de adjuvante, em três doses com intervalos de 15 dias, antes do acasalamento das ratas. Constatada a gestação, será feito o desafio oral das ratas com cistos, oocistos e taquizoítos de T. gondii. Serão utilizadas 80 ratas wistar gestantes, que serão distribuídas em dois experimentos. Cada experimento será composto por 8 grupos de 5 animais, da seguinte forma: Grupo 1 (n=5): vacinado e desafiado com cistos de T. gondii; Grupo 2 (n=5): controle do grupo 1, apenas desafiado com cistos de T. gondii; Grupo 3 (n=5): vacinado e desafiado com oocistos de T. gondii; Grupo 4 (n=5): controle do grupo 3, desafiado com oocistos de T. gondii; Grupo 5 (n=5): vacinado e desafiado com taquizoítos de T. gondii; Grupo 6 (n=5): controle do grupo 5, desafiado com taquizoítos de T. gondii; Grupo 7 (n=5): apenas vacinado, Grupo 8 (n=5): não vacinado e não desafiado. Semanalmente, desde a vacinação, serão realizadas análises sorológicas e hematológicas. Após a parição (experimento 1), as ratas e neonatos serão eutanasiados para determinação da carga parasitária no cérebro e na musculatura esquelética, pela PCR em tempo real, e colheita de tecido intestinal, para posterior realização de exames histopatológicos, imunológicos envolvidos na reposta imunológica contra o T. gondii. Durante a lactação (experimento 2), o leite será colhido, em dias alternados, para análise molecular do agente, além das demais análises realizadas no experimento 1.