Estudo da dinâmica catalítica da endo-1,4-beta-xilanase de Bacillus subtilis por espectroscopia de correlação de fluorescência

Resumo

As endo-1,4-beta-xilanases são endoglicosidades que catalisam a hidrólise do xilano. Devido à multiplicidade de aplicações potenciais das xilanases na produção de riquezas economicamente relevantes, o interesse por essas e outras glicosil hidrolases é crescente não só no meio acadêmico, como também no meio industrial, destacando-se os benefícios ambientais trazidos pelo seu uso no biobranqueamento da polpa de papel nas indústrias de papel e celulose e por proporcionar meios de se produzir biocombustíveis, melhorando o aproveitamento da biomassa e contribuindo para uma economia sustentável e socioambientalmente correta e responsável. No entanto, as xilanases não são robustas o suficiente para suportarem o ambiente industrial e, com isso, sua aplicação ainda não é economicamente viável. Por isso, a elucidação da dinâmica catalítica destas enzimas para a proposição de modelos mais refinados e robustos do que os que existem atualmente provavelmente constituirá uma importante etapa em sua melhoria através de técnicas de engenharia de proteínas. Desse modo, este projeto tem por objetivo geral obter novas informações acerca da dinâmica catalítica e cinética em nível de molécula única de uma xilanase GH11 inacessíveis por outras técnicas espectroscópicas e de simulação de dinâmica molecular, através de análises de medidas de FCS pelo modo de autocorrelação e excitação de um fóton de um fluoróforo ligado em diferentes posições da enzima durante sua interação com seu substrato e sob diferentes condições ambientais e reacionais. (AU)