Estudo da variação do perfil químico do limoeiro (C. limon), da laranjeira (C. sinensis) e da Limeira ácida Tahiti (C. latifolia) antes e depois da inoculação com Phyllosticta citricarpa e de linhagens do fungo relacionados à infecção por vírus RNA

Resumo

A mancha preta dos citros (MPC) ou pinta preta, causada pelo fungo Phyllosticta citricarpa afeta laranjeiras, tangerineiras, limoeiros e pomeleiros, sendo constatada na África, na Ásia, na Oceania e na América do Sul. Com exceção da laranjeira Azeda (C. aurantium) e seus híbridos, e da limeira ácida Tahiti (C. latifolia), todas as variedades comerciais são suscetíveis, principalmente os limoeiros verdadeiros (C. limon), que têm papel fundamental no início das epidemias da doença, e as laranjeiras (C. sinensis) de maturação média-tardia (Pêra) e tardia (Natal e Valência). No Estado de São Paulo já se verificaram até 100% de frutos afetados em áreas onde não se realizou nenhum tipo de controle. Os órgãos atacados pela MPC podem ser em ordem de frequência: frutos, folhas, pedúnculos, pecíolos, ramos verdes e espinhos. A MPC é de grande importância econômica, pois causa depreciação estética dos frutos e acarreta prejuízos na comercialização dos mesmos in natura no mercado externo. Quando ocorre alta infecção na região do pedúnculo de frutos em desenvolvimento pode haver queda prematura refletindo desta maneira na produção. Estas informações mostram a grande necessidade de um programa para o controle da MPC. Para a execução deste programa pesquisadores de diferentes áreas foram agregados em rede, e estes vem usando o conhecimento e experiência científica para melhorar as práticas de controle da MPC. Os metabólitos que um microrganismo sintetiza estão relacionados com o seu respectivo nicho ecológico. Este não só precisa sintetizar metabólitos para competir com outros patógenos, a fim de colonizar o hospedeiro, mas também para regular o metabolismo do hospedeiro em sua associação equilibrada. P. citricarpa está em contato com seus citros hospedeiros, formando uma intrigante e desafiadora dupla planta-microrganismo para estudos científicos, o qual seria inédito na literatura. Inicialmente pretende-se realizar o estudo da variação do perfil químico de citros após a inoculação do fungo P. citricarpa. Será inoculado o fungo em folhas de limoeiro verdadeiro e de limeira ácida Tahiti, e avaliada a variação dos metabólitos secundários na planta através do desenvolvimento de métodos analíticos como HPLC-UV, LC-UV-SPE-NMR e de ferramentas quimiométricas. As folhas da limeira ácida Tahiti podem ser um reservatório do fungo na fase sexual como G. citricarpa e responsáveis pela transferência do patógeno para outros órgãos e áreas de plantação. Aumento no conteúdo de algum metabólito secundário na planta poderá estar relacionado com os mecanismos de defesa internos induzidos. Ou seja, entendendo como a planta se defende desse microrganismo trará informações de novos defensivos para P. citricarpa. Além disso, o isolamento do tirosol de P. citricarpa instigou novas investigações sobre a possível função do mesmo no evento da patogenicidade em Citros, uma vez que há relatos na literatura sobre estudos da atividade sinalizadora e auto-reguladora desta molécula em alguns fungos endofíticos. Na tentativa de se verificar esse efeito do tirosol, pretende-se aplicar soluções dele em diferentes concentrações sobre as folhas de mudas de limoeiro verdadeiro e de limeira ácida Tahiti e avaliar se há o surgimento de sintomas similares àquelas ocasionadas pelo fungo P. citricarpa. Essas inoculações e estudos de perfil químico acima também serão efetuados nos frutos da laranjeira Valência. Alguns isolados de P. citricarpa apresentam infecção por vírus de RNA dupla fita (RNAdf) com efeitos fenotípicos ainda desconhecidos. Segundo a literatura linhagem curada apresenta um aumento na virulência, o que indica um fenótipo hipovirulento associado ao RNAdf. O fenótipo hipovirulento pode apresentar perfil químico diferente, ou algum metabólito secundário em maior quantidade. Os resultados dessa proposta também abrem possibilidades de estudos em engenharia genética sobre a biossíntese dos compostos encontrados, com possibilidades de indução de resistência em citros. (AU)