Ultrassonografia modo-B, Doppler, Elastografia e Contrastada por Microbolhas (CEUS) do Sistema Reprodutor de Cães e a Correlação Com a Qualidade Espermática

Resumo

Objetiva-se realizar um estudo dos testículos, epidídimo e próstata de cães por meio da ultrassonografia Modo-B, Doppler, Elastografia e Ultrassonografia Contrastada por Microbolhas (CEUS) com o intuito de correlacionar os parâmetros das técnicas ultrassonográficas com a qualidade seminal na espécie canina, estabelecendo parâmetros ultrassonográficos preditivos da qualidade do sêmen. Serão avaliados 30 cães de 1 a 9 anos de idade de até 25kg, que serão separados em três grupos experimentais de acordo com a idade: G1 - até 3 anos; G2: 3 a 6 anos; G3: 6 a 9 anos. Ao modo-B, os testículos, epidídimo e próstata serão avaliados quanto ao tamanho, volume, contornos, formato, ecogenicidade e ecotextura. A avaliação Doppler da artéria testicular será realizada em cinco porções diferentes, de cada testículo: supratesticular proximal; supratesticular média, supratesticular distal, marginal; intratesticular. A porção cranial da artéria prostática será avaliada ao método Doppler. Os parâmetros obtidos por meio desta avaliação serão a morfologia do traçado espectral e valores dopplervelocimétricos: velocidade de pico sistólico (VPS) velocidade diastólica final (VDF), velocidade máxima média do ciclo (TaMax), velocidade mínima média do ciclo (TaMin), índice de resistividade (IR) e índice de pulsatilidade (IP). A avaliação elastográfica será realizada de forma qualitativa, obtendo um elastograma da rigidez relativa dos testículos e da próstata, bem como de forma quantitativa, obtendo valores de velocidade de cisalhamento. A rigidez testicular será mensurada em três porções nomeadas de acordo com suas proximidades anatômicas: testicular livre (PTL), mediastinal (PTM) e epididimária (PTE). A avaliação elastográfica do epidídimo será realizada na cabeça, corpo e cauda. Para a rigidez prostática, serão obtidos valores de rigidez tecidual em diferentes regiões: ventral, central e dorsal. A CEUS dos testículos e próstata será realizada utilizando omeio de contraste SonoVue® (Bracco, São Paulo, SP, Brasil), administrado por via intravenosa. Serão avaliados de forma qualitativa e, posteriormente, quantitativa, determinando-se os parâmetros de perfusão dos órgãos avaliados: número de pixels (NP) pico de intensidade (PI em %), tempo para o pico de intensidade (Tp em s), tempo médio de transmissão (TmT) e a área sob a curva (AUC). O sêmen dos animais será coletado por meio de manipulação digital. Após a coleta, serão realizadas avaliações referentes aos seus aspectos macroscópicos (volume, aspecto, coloração) e microscópicas. A concentração espermática será calculada por diluição em câmara de Neubauer (1:20). A análise computadorizada do sêmen (sistema CASA) será efetuada para obter dados referentes à cinética espermática: motilidade total (MT); motilidade progressiva (MP); velocidade de trajeto (VAP); velocidade progressiva (VSL); velocidade curvilinear (VCL); amplitude do deslocamento lateral da cabeça (ALH); frequência de batimento (BCF); retilinearidade (STR); linearidade (LIN); coeficiente de oscilação (WOB); e células rápidas (RAP). A análise da morfologia espermática será realizada por meio de preparo úmido em microscopia de contraste diferencial interferencial. Ainda, serão realizados testes de integridade de membrana plasmática, integridade de membrana acrossomal e potencial da membrana mitocondrial por meio da associação de três sondas fluorescentes (iodeto de propídio, FITC-PSA e JC-1) e a integridade do DNA espermático será avaliado por meio do corante laranja de acridina por meio de microscopia de epifluorescência. As variáveis estudadas serão submetidas à uma análise de componentes principais, tentando identificar quais variáveis afetam a composição espermática com relação aos dados considerados normais para cães e identificar dois componentes com as variáveis que permitam explicar pelo menos 70% da variabilidade. Dessas, será realizada uma regressão de mínimos quadrados parciais, tentando relacionar o conjunto de preditores estudados co