Alterações subcelulares causadas pela ferrugem tardia em framboesas e o efeito do déficit hídrico na severidade da doença: análises de microscopia confocal e eletrônica de transmissão

Resumo

O projeto BEPE visa aprimorar experimentos em andamento, incorporando técnicas de microscopia. O objetivo é esclarecer alterações nos cloroplastos em folhas de framboesa colonizadas por Aculeastrum americanum e investigar se o estresse abiótico (limitação hídrica) altera a colonização do patógeno. Para isso, plantas de framboesa (Rubus idaeus L.) cv. Heritage com e sem limitação hídrica serão inoculadas com suspensão de urediniósporos de A. americanum, ajustada para concentração de 5x104 urediniósporos mL-1. Amostras de folhas, coletadas aos 7 e 14 dias após a inoculação, serão processadas para duas análises. Para microscopia eletrônica de transmissão, as amostras serão fixadas em glutaraldeído 3% e tampão cacodilato (0,2 M pH 7,2) por 48 h, processadas e os blocos contendo amostras serão enviados ao Max Planck Institute for Plant Breeding Research (MPIPZ) antecipadamente pelos correios. Para microscopia confocal de varredura a laser, as amostras serão fixadas em ácido tricloroacético 0,15% em etanol/clorofórmio 4:1. As amostras serão enviadas ao MPIPZ, onde será aplicado o protocolo de dupla coloração WGA-AF488 e Iodeto de Propídio e realizada microscopia confocal de varredura a laser. Essas análises serão importantes para complementar meus resultados obtidos até o momento. O BEPE será realizado no MPIPZ, Colonia-Alemanha, sob a supervisão do Dr. Tonni Grube Andersen, especialista em estudos histológicos e moleculares de interações planta-patógeno e planta-ambiente, durante um período de 4 meses.