Cultivo in vitro, PCR e nested PCR na detecção de Theileria equi em eqüinos submetidos a exercícios

Autor(es)

C.D. Baldani ^[1] ; P.A. Canola ^[2] ; J.C.L. Neto ^[3] ; R.Z. Machado ^[4]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] UNESP. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária

^[2] UNESP. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária

^[3] UNESP. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária

^[4] UNESP. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia; v. 60, n. 3, p. 550-558, 2008-06-00.

Resumo

Comparou-se a utilização do cultivo in vitro, PCR e nested PCR no diagnóstico de Theileria equi em eqüinos submetidos ao estresse induzido por exercícios. Amostras de sangue foram obtidas de 15 eqüinos submetidos a treinamento em esteira rolante de alto desempenho, sendo as amostras colhidas antes e após os exercícios. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 30 dias de treinamento (G1) e 90 dias de treinamento (G2). O teste do qui-quadrado foi empregado para as análises estatísticas e o índice kappa utilizado para avaliar a concordância. Não houve diferença significativa entre as amostras obtidas em repouso e após exercícios. Merozoítas de T. equi foram detectados em apenas quatro eqüinos do G1 pela microscopia direta realizada antes do cultivo, enquanto 14 animais apresentaram-se positivos pelo cultivo in vitro. No G2, cinco e 11 eqüinos foram positivos antes e após o cultivo, respectivamente. Nenhum produto de amplificação foi observado pela técnica de PCR, apesar do PCR baseado no gene 16S rRNA de T. equi ter detectado DNA em sangue com parasitemia equivalente a 8x10-5%. O nested PCR, baseado na seqüência do gene do antígeno de merozoíta de T. equi (EMA-1,) permitiu a visualização de produtos de amplificação em todos os eqüinos testados. O nested PCR deve ser considerado para a detecção de infecções subclínicas de T. equi e o cultivo in vitro pode ser utilizado como uma ferramenta complementar a outros métodos de diagnóstico. (AU)

• Processo FAPESP: 02/06126-1 - Estudo comparativo da detecção direta do parasito Babesia equi através das técnicas de esfregaço sanguíneo, reação de imunofluorescência indireta, cultivo celular "in vitro" e reação em cadeia da polimerase (PCR) em equinos naturalmente parasitados
• Beneficiário: Cristiane Divan Baldani
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Processo FAPESP: 02/13561-6 - Estudo comparativo da detecção direta do parasito Babesia equi através das técnicas de esfregaço sanguíneo, reação de imunofluorescência indireta, cultivo celular in vitro e reação em cadeia de polimerase (PCR) em equinos naturalmente parasitados
• Beneficiário: Rosangela Zacarias Machado
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular