Análise da influência da interleucina 10 nas repostas celular e humoral promovida pelo direcionamento de antígenos para células dendríticas CD8a+DEC205+

Resumo

As células dendríticas convencionais (cDCs) são células apresentadoras de antígenos capazes de instruir a resposta imune adaptativa e influenciar a polarização de células T CD4+. De acordo com a expressão de diferentes marcadores de superfície, as cDCs pode ser divididas em dois subtipos básicos: CD8±+DEC205+ e CD8±-DCIR2+. Resultados prévios do nosso laboratório indicam que as cDCs CD8±+DEC205+ são capazes de instruir células T CD4+ com polarização para o perfil Th1 e também células T CD4+ produtoras de IL-10. Sabe-se que a IL-10 é uma citocina que possui capacidades anti-inflamatórias, atuando na regulação e supressão da expressão de citocinas pró-inflamatórias. Entretanto, pouco ainda se sabe sobre o papel da IL-10 na promoção da resposta imune induzida em protocolos de vacinação que direcionam antígenos para cDCs CD8±+DEC205+. Neste sentido, pretendemos utilizar um modelo de direcionamento de antígenos para cDCs CD8±+DEC205+ que consiste no uso de um anticorpo monoclonal (mAb) quimérico (anti-DEC205) fusionado a uma proteína de interesse (ovalbumina) para enviá-la diretamente para essas células. Esta estratégia tem sido amplamente utilizada para o estudo de respostas imunes celulares e humorais, inclusive como estratégia vacinal para indução de respostas imunes protetoras contra diferentes patógenos. Assim, pretendemos analisar os efeitos promovidos pela IL-10 no contexto do direcionamento de antígeno para cDCs CD8±+DEC205+ utilizando camundongos C57BL/6 IL-10 "knockouts" (IL-10 KO) e C57BL/6 selvagens (WT). Para isto, realizaremos imunizações utilizando o mAb anti-DEC205 fusionado à proteína ovalbumina (±DEC-OVA) e um mAb que consiste em um isotipo controle (ISO-OVA) na presença do adjuvante poly (I:C). Após a segunda dose, a resposta de células T CD4+ do tipo Th1, células do centro germinativo e a resposta humoral serão analisadas no baço e nos soros dos camundongos. Também pretendemos analisar a influência da IL-10 na resposta imune protetora induzida pelo direcionamento de antígenos para cDCs CD8±+DEC205+, desafiando camundongos WT e IL-10 KO com células do melanoma B16F0-OVA. Deste modo, esperamos elucidar mais detalhadamente alguns dos efeitos da IL-10 na resposta imune promovida pelo direcionamento do antígeno para as cDCs CD8±+DEC205+.