Desenvolvimento diferencial entre embriões XX e XY no período pré-implantação e padrão de expressão dos genes TSPX e SRY

Resumo

O desenvolvimento embrionário diferencial entre os sexos, mesmo antes do aparecimento das gônadas, tem sido descrito. Genes do cromossomo Y, que se expressassem em fases muito precoces, poderiam ter um efeito de aceleração e os de X, quando em dose dupla, um efeito de retardamento durante o desenvolvimento inicial, antes da implantação. A expressão do SRY (Sex-determining Region on Y chromosome), gene importante na determinação testicular, foi detectada em fases precoces do desenvolvimento. Por outro lado, foi recentemente descrito no cromossomo X um gene homólogo ao TSPY (Testis-Specific Protein, Y-encoded), o TSPX, que participa do controle do ciclo celular. A utilização de embriões humanos para pesquisa, embora seja de grande interesse, constitui-se em um problema ético importante. O presente projeto tem por objetivo verificar o padrão de expressão do gene TSPX nas fases iniciais do desenvolvimento embrionário e compará-lo ao do gene SRY. Para isso, serão utilizadas técnicas de extração de DNA e RNA, reação em cadeia da polimerase (PCR), transcriptase reversa e PCR em tempo real, utilizando embriões bovinos (com 2-4, 4-8, 8-16 células, mórula e blastocisto), obtidos através de fetilização in vitro (FIV). Este trabalho será importante na implantação de metodologias envolvendo modelo animal para estudos de expressão gênica durante o período pré-implantação que poderá auxiliar no entendimento do desenvolvimento embrionário normal e de patologias humanas. (AU)