Caracterização genotípica de amostras de Toxoplasma gondii isoladas de ovinos de abatedouro

Resumo

O Toxoplasma gondii é um parasita de grande importância no contexto de produção animal e saúde pública, envolvendo alterações fetais e abortos na espécie humana e em animais, sendo também um importante patógeno oportunista em pacientes imunocomprometidos. Possui uma estrutura populacional predominante de linhagens designadas I, II e III. A transmissão do parasita por alimentos tem sido caracterizada como de alto risco à saúde humana. Na espécie ovina, tem sido considerado um significante agente causador de abortamentos, além de se apresentar como um risco potencial de infecção pelos alimentos derivados de ovinos, maior que os de suínos. Serão colhidas amostras de sangue, cérebro, pulmão, língua, diafragma e coração de ovinos destinados ao abate, em abatedouro municipal de São Manuel-SP. Após a dessora, as amostras de soro serão submetidas às provas sorológicas de aglutinação direta modificada, com antígeno inativado pelo metanol (MAT-AM) ou formalina (MAT-AF), permitindo a diferenciação entre os estágios da infecção toxoplásmica, e à reação de imunofluorescência indireta (RIFI). As amostras teciduais dos animais soropositivos serão maceradas e parte delas será submetida à digestão pela pepsina, inoculando os materiais, digeridos ou não, em camundongos para o isolamento do parasita. Será realizada a genotipagem das amostras isoladas, pela análise das técnicas de polimorfismo de fragmentos de restrição (RFLP-PCR) do gene SAG2, e multiplex-PCR, em cinco loci (TUB2, W35, TgM-A, B18 e B17). Desta forma, pretende-se isolar e caracterizar genotipicamente amostras de T.gondii isoladas de tecidos de ovinos abatidos para o consumo humano; detectar a fase da infecção em que o animal foi abatido, pela comparação de provas sorológicas; e comparar os perfis de genotipagem obtidos na RFLP-PCR do gene SAG2 e multiplex-PCR.