Avaliação da influência do flúor no reparo ósseo em alvéolos de ratos

Resumo

A compreensão do mecanismo molecular do reparo ósseo e a influência de alguns fatores sobre esse reparo podem ajudar no tratamento de fraturas e defeitos ósseos. O flúor é um elemento presente no cotidiano de quase toda população brasileira, sendo usado na água de abastecimento (Brasil) e também como terapêutico para osteoporose (comumente na Europa). Assim sendo é importante a compreensão da influência do flúor no reparo fisiológico do tecido ósseo. Neste estudo serão utilizados 4 grupos com ratos Wistar de 80 dias (n=200), os quais receberão água de beber contendo 5, 15 e 50 ppm de flúor e água deionizada (controle) durante todo experimento. Esses animais terão o incisivo superior direito extraído. Os animais serão mortos 0 hora, 7, 14, 21 e 30 dias após a extração e coletado material para análise microscópica (coloração de Hematoxilina Eosina e imunistoquímica), de flúor e proteínas referentes ao reparo ósseo (BMPs, MMPs, TRAP, RANK, RANKL e OPG), por zimografia, western blot e proteômica. Será feita análise de flúor nos tecidos reacionais com o eletrodo, após difusão facilitada por hexamethyldisiloxano. Após a preparação das proteínas dos tecidos reacionais dos ratos, as mesmas serão submetidos à eletroforese bidimensional. Os géis dos grupos controle e tratados serão escaneados utilizando-se o ImageScanner e analisados com o software ImageMaster Platinum. Os spots de interesse serão então excisados e analisados por espectrometria de massa (MALDI-TOF) para identificação das proteínas. Em adição, o efeito do flúor na atividade das proteínas fosfatases das células ósseas e tecidos adjacentes e a determinação das proteínas fosforiladas em resíduos de tirosina serão realizados através de Western Blotting. A análise paramétrica será realizada utilizando análise de variância (teste de Tukey se p<0,05). (AU)