Estudos cristalográficos da enzima clorocatecol 1,2-dioxigenase de Pseudomonas putida

Resumo

A crescente demanda de produtos industrializados e décadas de práticas da agricultura moderna são responsáveis pelo aumento da quantidade de poluentes que são descartados no meio ambiente. Muitos destes compostos, como os hidrocarbonetos aromáticos policíclicos, são resistentes à degradação por técnicas físicas e químicas como incineração, destruição catalítica e o uso de adsorventes. Uma estratégia biotecnológica moderna e eficaz para a eliminação desses compostos é denominada biorremediação e se baseia na utilização de microorganismos, ou suas enzimas, para reduzir ou eliminar perigos ambientais resultante da acumulação de produtos químicos tóxicos transformando contaminantes em substâncias inertes, CO2 e água. Um exemplo é a utilização das dioxigenases, enzimas que catalisam a oxidação de diferentes substratos através da transferência de átomos do dioxigênio (O2) e que são encontradas em várias vias metabólicas de bactérias. O projeto aqui apresentado visa à determinação da estrutura cristalográfica da enzima clorocatecol 1,2-dioxigenase da bactéria Pseudomonas putida, enzima encontrada na via degradativa de compostos clorinados exibindo alta especificidade a catecol e clorocatecol, apresentando também ampla especificidade para substratos halogenados derivados de catecol. Nosso objetivo é utilizar o mapeamento estrutural, corroborado com os estudos bioquímicos e biofísicos já disponibilizados para esta enzima, para a sua caracterização funcional, como o entendimento sobre o mecanismo de seleção aos diferentes substratos e o papel dos fosfolipídios com a atividade da enzima e sua ativação. (AU)