Avaliação da influência da irradiação com laser em baixa intensidade na expressão de RANKL e OPG em osteoblastos in vitro.

Resumo

A irradiação com laser em baixa intensidade tem se mostrado um fator terapêutico após tratamentos convencionais, diminuindo o tempo de cicatrização e agindo como antiinflamatório e analgésico. Essa irradiação tem comprimentos de ondas específicos que alteram o comportamento celular agindo nas mitocôndrias e nos canais de cálcio. Osteoblastos são células com intensa atividade metabólica e responsáveis pela produção da parte orgânica da matriz (colágeno tipo I, proteoglicanas e glicoproteínas). Com relação aos efeitos do laser em osteoblastos, os estudos têm mostrado resultados positivos no aumento na produção de fosfatase alcalina, osteocalcina, osteopontina e sialoproteína óssea. Há também, aumento expressivo na adesão e proliferação dos osteoblastos e produção de nódulos mineralizados. O objetivo deste trabalho será a de avaliar a influência da fototerapia com laser em baixa intensidade na viabilidade e atividade enzimática de osteoblastos e se existe influência dessa terapia na expressão de RANKL e OPG produzidas por essas células. Para o experimento serão utilizados osteoblastos da linhagem MC3T3 (ATCC) que serão plaqueadas em placas de 96 poços e nelas serão irradiadas laser vermelho (660nm) e infravermelho (780nm) nas doses de 3 e 5 J/cm², além de um grupo controle sem irradiação. Para a análise da viabilidade celular será feito a redução de MTT e captação do Vermelho Neutro; para a análise da expressão de RANKL e OPG será feita a quantificação dos transcritos por RT-PCR. As análises estatísticas serão feitas através do teste estatístico one-way ANOVA complementado pelo teste de Tukey, teste de Kruskal-Wallis complementado pelo teste de Dunn e pelo teste "t", de acordo com sua indicação (p<0,05).Palavra-chave: Cultura celular, fototerapia, laser de baixa intensidade, osteoblastos MC3T3.