Instalação de um equipamento de Surface Plasmon Ressonance (SPR) na UNIFESP

Resumo

A diversidade de atividades biológicas presentes em artrópodes hematófagos, somada a importância destes como vetores de doenças têm motivado o grupo a investigar a presença de novas moléculas anti-hemostáticas e inibidores de proteases em três espécies de artrópodes com grande relevância no Brasil como transmissores de doenças para humanos e animais, sendo eles: o barbeiro Triatoma infestans, o carrapato bovino Rhipicephalus (Boophilus) microplus e o mosquito Aedes aegypti. Ao longo dos últimos dez anos, o nosso grupo descreveu mais de 10 proteínas ativas presentes nesses vetores das quais duas foram patenteadas e atualmente estamos trabalhando na caracterização de pelo menos mais 15 proteínas diferentes. Dentre elas, foram caracterizadas bioquimicamente com as técnicas disponíveis, os inibidores de trombina e subtilisina A, o AaTI (Aedes aegypti thrombin inhibitor) e a infestina IR, respectivamente; lipocalinas, a tilipo33 (inibidor de agregação plaquetária de T. infestans), tilipo37, tilipo39 e tilipo77 (proteínas anticoagulantes hipotéticas); o BmCI (Boophilus microplus chymotrypsin inhibitor) que é uma proteína com atividade pró-apoptótica. No entanto, necessitamos atualmente de técnicas que permitam medir as interações entre duas moléculas. Por exemplo, a técnica de SPR (Surface Plasmon Ressonance) para identificar se o inibidor AaTI liga-se à trombina, heparina, e ao fibrinogênio. Recentemente, fizemos duas tentativas utilizando este sistema no laboratório do Dr. Lauro Kubota, da UNICAMP, mas como a padronização dos experimentos exigia a utilização do equipamento por várias semanas, decidimos postergar os nossos trabalhos. Acreditamos que a aquisição deste equipamento será extremamente importante para respondermos esta e outras perguntas como descrever quais receptores plaquetários interagem com a proteína salivar de Triatoma infestans Tilipo33 e o mecanismo de interação de BmCI (Lima et al., 2009) necessário para indução de apoptose. Este equipamento será o primeiro a funcionar na UNIFESP e certamente também contribuirá nas investigações dos projetos dos grupos associados e complementares que apoiam este pedido. (AU)