Determinação dos aminoácidos essenciais e da influência das bases nitrogenadas em cultivo contínuo de Streptococcus pneumoniae sorotipo 14

Resumo

O Streptococcus pneumoniae é um importante microrganismo causador, principalmente, de pneumonia, mas também de sinusite, otite, meningite e sepse, e as vacinas são a maneira mais eficaz para prevenção dessas doenças. Todas as vacinas existentes baseiam-se na proteção dada pelo polissacarídeo (PS) da cápsula, mas devido ao preço elevado essas vacinas não são acessíveis às populações carentes. Para se obter uma vacina mais barata é necessário o desenvolvimento de processos de produção que abaixem o custo e aumentem o rendimento de PS, entretanto, o cultivo de S. pneumoniae foi relativamente pouco estudado, por isso poucas estratégias para melhoria desses processos estão disponíveis na literatura. S. pneumoniae é anaeróbio aerotolerante e seu metabolismo é restrito à fosforilação ao nível do substrato, formando principalmente lactato, o qual provoca repressão catabólica e restringe assim a produtividade tanto do microrganismo como do PS. A interação entre o metabolismo central e a síntese da cápsula não ainda está clara. Em nosso laboratório, cultivos contínuos de S. pneumoniae sorotipo 14, que apresenta a maior prevalência entre crianças no Brasil e um dos de maior incidência mundial, foram realizados em meios complexo e quimicamente definido e permitiram concluir que a produção de PS14 é associada ao crescimento celular. Além disso, vitaminas essenciais e concentrações não-limitantes de glicose e colina em meio definido foram determinadas. Este projeto tem como objetivo continuar o estudo do comportamento de S. pneumoniae sorotipo 14 e da cinética de produção de PS14 em cultivos contínuos, empregando o meio definido previamente elaborado no laboratório, e tendo como nutrientes limitantes aminoácidos e bases nitrogenadas em condições de excesso de glicose e de colina. Pretende-se assim contribuir para ampliar a compreensão da interação entre o metabolismo central, a formação de biomassa e a produção de PS14. (AU)