Análise dos cromossomos sexuais de Pseudis tocantins (Anura, Hylidae)

Resumo

O gênero Pseudis compreende atualmente 11 espécies, 10 delas já cariotipadas. Dentre essas, apenas P. tocantins apresenta cromossomos sexuais heteromórficos, o que sugere que a diferenciação desses cromossomos tenha sido um evento recente na história do gênero. O estudo desses cromossomos pode, portanto, oferecer importantes dados para o estudo da evolução cariotípica em Pseudis. O cromossomo Z de P. tocantins é metacêntrico, já o cromossomo W é subtelocêntrico e de tamanho maior do que o Z. Além disso, os cromossomos Z e W diferem em relação ao padrão de distribuição de heterocromatina e de NOR. Enquanto o cromossomo Z apresenta uma banda heterocromática pericentromérica no braço longo e adjacente a ela uma NOR de localização intersticial, no braço longo do cromossomo W é a NOR que ocupa posição pericentromérica, enquanto a banda heterocromática adjacente a ela assume localização intersticial e se apresenta bem maior do que aquela do cromossomo Z. Esses dados sugerem o envolvimento de inversão cromossômica e de sequências repetitivas na divergência evolutiva desses cromossomos. Apesar desses interessantes dados, ainda não conhecemos nada acerca da composição molecular desses cromossomos. No presente projeto, pretendemos investigar a composição molecular dos cromossomos Z e W de P. tocantins, visando a contribuir para a análise de sua origem evolutiva. Para tanto, isolaremos fragmentos de restrição a partir do DNA genômico de P. tocantins, buscando encontrar sequências localizadas nos cromossomos Z e W. Pretendemos, ainda, empregar a técnica de CGH, com o intuito de estimar o nível de diferenciação molecular existente entre os cromossomos Z e W. Por fim, iniciaremos também experimentos de microdissecção dos cromossomos Z e W de P. tocantins, com o objetivo de construir sondas que possam ser futuramente hibridadas no cariótipo de espécies filogeneticamente relacionadas. (AU)