Avaliação da influência da temperatura e do tempo de estocagem na detecção e quantificação de amostras de bactérias da cavidade oral pela técnica DNA Checkerboard

Resumo

Diversos métodos moleculares de diagnóstico têm sido largamente utilizados para a detecção e quantificação de espécies microbianas que podem habitar a cavidade oral, exercendo um papel na manutenção da saúde ou desenvolvimento de doenças. A estocagem de amostras de DNA bacteriano por um longo período de tempo pode comprometer o material genético das espécies, afetando os resultados obtidos por estes métodos moleculares. O objetivo do presente estudo será avaliar o efeito de diferentes temperaturas e tempos de estocagem sobre a qualidade final do DNA de amostras provenientes da cavidade oral. Amostras de saliva e biofilme bacteriano supra-gengival serão colhidas de 10 pacientes saudáveis e avaliadas pela técnica de hibridização DNA Checkerboard. As amostras serão testadas imediatamente após a colheita (tempo zero-controle) e após 2 semanas, 1 mês, 6 meses ou 12 meses de estocagem em temperatura ambiente, 4°C, -20°C e -80°C. Além da determinação das espécies e número de microrganismos presentes nas amostras de saliva e biofilme bacteriano, será realizada uma análise de correlação entre as amostras nos protocolos propostos.