Genotipagem de Giardia duodenalis: detecção de infecções mistas e recombinações gênicas em amostras de origem humana

Resumo

Giardia duodenalis é um protozoário de distribuição mundial responsável por causar infecções entéricas em uma grande variedade de mamíferos, incluindo os humanos. É considerada uma espécie complexa, no qual os isolados podem ser classificados em sete agrupamentos genéticos distintos (assemblages A, B, C, D, E, F, G), mas morfologicamente indistinguíveis. Os agrupamentos genéticos de G. duodenalis possuem diferentes espectros de hospedeiros. Dois fenômenos têm sido cada vez mais freqüentes em estudos moleculares: (i) ocorrência de seqüências gênicas heterogêneas, caracterizadas pela presença de sítios polimórficos, quando os genes são amplificados e seqüenciados com primers não assemblage específicos e (ii) divergência entre lócus, quando diferentes assemblages são assinalados por marcadores genéticos distintos utilizados em uma mesma amostra. Heterozigose de sequência alélica, recombinação genética e infecções mistas seriam as explicações para tais acontecimentos, porém, a única maneira de avaliar a real participação desses fenômenos em amostras de G. duodenalis seria através da análise de um único cisto de Giardia. Até o presente momento nenhum trabalho desta natureza foi realizado. Em vista de tal carência, o projeto em tela tem como principal objetivo o isolamento de cistos de G. duodenalis através da técnica de micro-manipulação e posterior genotipagem através da técnica de real time PCR. Os resultados a serem obtidos deverão trazer contribuição ao conhecimento genético e taxonômico de G. duodenalis, bem como ao conhecimento epidemiológico das giardíases.