Campomanesia adamantium E Campomanesia guaviroba: Estudo Fitoquímico e Avaliação de atividades Biológicas in vitro e in vivo.

Resumo

Neste projeto é proposto estudo para a busca de substâncias antiproliferativas acumuladas no extrato etanólico das folhas de Campomanesia adamantium e Campomanesia guaviroba (Myrtaceae). Para tanto, proceder-se-á adequação da metodologia para a avaliação da atividade antiproliferativa frente às linhagens de células tumorais humanas in vitro e para o estudo in vivo utilizando o modelo de tumor de Ehrlich. O estudo fitoquímico terá como objetivo a identificação das frações e dos constituintes majoritários ativos. Inicialmente obter-se-á o perfil dos extratos ativos (CCD, CLAE, ESI-MS/MS), podendo-se identificar algumas substâncias conhecidas diretamente nos extratos brutos (desreplicação). Os extratos ativos com substâncias que não puderem ser identificadas na etapa de desreplicação serão submetidos ao fracionamento guiado pela atividade antiproliferativa in vitro e para as substâncias isoladas e purificadas será realizada a elucidação estrutural utilizando-se métodos espectroscópicos de análise (UV, IV, RMN (1D e 2D) ESI-MS/MS). As frações que apresentarem melhor atividade antiproliferativa frente às linhagens celulares in vitro serão estudadas in vivo, procedendo-se análise da toxicidade aguda e avaliando a atividade em Tumor sólido de Erhlich em camundongos. Ainda, busca-se avaliar se o efeito de morte celular frente às linhagens tumorais das substâncias purificadas ativas que possuírem quantidade em massa ocorre por apoptose pela análise de expressão dos genes BAX, BCL-2 e TNF e por citometria de fluxo (Anexina V e fragmentação do DNA) na linhagem celular que apresentar maior efeito antiproliferativo. Assim, será realizado o estudo com C. adamantium e C. Guaviroba para a busca de substâncias com atividade antiproliferativa, visando obter novas fontes de insumos farmacêuticos.