Estudo das fibras constituintes da matriz extracelular e da expressão de metaloproteases durante o desenvolvimento do enfisema pulmonar induzido por elastase em camundongos

Resumo

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é a quarta principal causa de mortalidade no mundo e uma importante e crescente causa de morbidade crônica, gerando significativa incapacidade e redução da qualidade de vida para seus portadores e altos custos para a saúde pública. No enfisema, o parênquima pulmonar (incluindo os componentes da matriz extracelular) se encontra em um constante processo de destruição e remodelamento, acarretando alterações importantes das propriedades mecânicas e estruturais do tecido. Considerando que os estudos experimentais de enfisema têm demonstrado um aumento da deposição das fibras de colágeno e elástica após a instalação da doença (por volta do 21º dia após instilação), pretendemos neste estudo avaliar componentes da matriz, já nas primeiras horas (1, 3 e 6h), 3 e 21 dias após indução da doença para detectar se em algum momento anterior ao 21º dia existe diminuição destas fibras. Para tanto camundongos C57BL/6 serão submetidos a um protocolo de enfisema pulmonar por instilação intranasal de elastase pancreática de porco (0,667UI) e serão sacrificados em diferentes tempos:1, 3, 6 horas, 3 e 21 dias após instilação. Os grupos controle receberão o mesmo tratamento com solução fisiológica (NaCl 0.9%). Nos tempos determinados, os animais serão anestesiados e sacrificados para a retirada dos pulmões.Serão feitos cortes e colorações específicas destes pulmões para quantificação do intercepto linear médio, proporção de volume das fibras: colágeno tipo I e III, elastina e fibrilina. Avaliaremos também a expressão gênica das diferentes metaloproteases (MMP-1, MMP-8, MMP-12 e MMP-13).