Análise microbiológica do efeito da terapia fotodinâmica em infecções bacterianas

Resumo

O objetivo deste projeto é analisar os efeitos da terapia fotodinâmica (PDT) para redução do número de bactérias utilizando diferentes fotossensibilizadores (PS): Photogem®, Curcumina, Photodithazine® (PDZ), Azul de Metileno livre (não encapsulado) e Nanopartículas de azul de metileno. Estes fotossensibilizadores e as respectivas fontes de luz serão aplicados em microrganismos da placa dental em fase planctônica e em biofilme. A resposta à terapia fotodinâmica será avaliada comparativamente entre as fases (planctônica e biofilme) estudadas. Suspensões de microrganismos serão sensibilizadas com diferentes concentrações dos fotossensibilizadores de 15 a 70 µg/mL durante 10 minutos seguidos por exposição à luz vermelha (630 nm ou 665 nm), ou azul (450nm), de acordo com os PS aplicados. Além do estudo em suspensão, microrganismos das mesmas amostras, serão cultivados em condições de anaerobiose para formar o biofilme. Durante 7 dias, em placas de 96 poços contendo agar sangue enriquecido serão desenvolvidos biofilmes in vitro. Estes biofilmes serão expostos às maiores concentrações dos fotossensibilizadores (40 a 70 µg/ml) na mesma fluência que será irradiada a fase planctônica. Depois de aplicar a PDT, frações de sobrevivência serão calculadas contando as unidades formadoras de colônia (u.f.c.) de cada grupo a ser estudado. Por meio de técnica de microscopia confocal, será investigada o comportamento bacteriano frente à PDT. Além disso, estudos espectroscópicos e de degradação dos fotossensibilizadores também serão avaliados por detecção de fluorescência. (AU)