Utilização da Zerumbona para potencializar a inativação fotodinâmica do biofilme de CANDIDA ALBICANS: avaliação em isolados clínicos resistentes ao fluconazol e em modelo murino de candidíase oral

• Processo: 24/00741-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2026
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Ana Cláudia Pavarina
• Beneficiário: Ana Cláudia Pavarina
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Biofilmes Candida albicans Óleos essenciais Microbiologia aplicada
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biofilmes | Cândida Albicans | óleo essencial | Resistência antifúngica | Microbiologia Aplicada

Resumo

A resistência antifúngica a fármacos convencionais tem sido uma dificuldade no controle das infecções fúngicas. Abordagens que reduzem as substâncias poliméricas extracelulares, enfraquecem a estrutura do biofilme tornando o mesmo mais suscetível a ação de terapias antifúngicas. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) vem sendo investigada para o controle dos biofilmes de Candida albicans com resultados promissores no que se refere a redução do biofilme de cepas susceptíveis ao fluconazol, entretanto, as cepas resistentes ao fluconazol apresentam susceptibilidade reduzida à aPDT. Em estudo prévio foi observado que a Zerumbona (ZER) reduziu a viabilidade celular e os componentes da matriz extracelular de biofilmes de C. albicans susceptível (CaS) e resistente ao fluconazol (CaR) sendo uma alternativa promissora para terapias antifúngicas. Neste contexto, o presente estudo será conduzido para avaliar a viabilidade da utilização do ZER associado à aPDT na inativação de isolados clínicos resistentes ao fluconazol e no tratamento de candidose oral induzida em camundongos contaminados com cepas de CaS e CaR. Para isso, este projeto está dividido em três etapas, descritas a seguir: Objetivo I) Avaliar eficácia do ZER associado à aPDT (mediada pelo PDZ associada a luz LED), em biofilmes de CaS (ATCC) e CaR [ATCC e isolados clínicos (R14 e R70)] com foco na redução da população fúngica e dos componentes da matriz extracelular do biofilme [polissacarídeos solúveis em água (WSP), polissacarídeos solúveis em alcali (ASP), DNA extracelular (eDNA), proteínas e biomassa (total e insolúvel)]; Objetivo II): Avaliar o efeito citotóxico da associação do ZER à aPDT sobre células humanas (NOK-si e FGH) em um modelo de co-cultivo 3D infectado por CaS e CaR; e, Objetivo III: Avaliar se a aplicação do ZER potencializa a ação da aPDT no tratamento de candidose oral induzida em camundongos infectados com cepas de CaS e CaR, com foco na recuperação da população fúngica viável e resolução das lesões na língua dos animais. Além da avaliação microbiológica, também será realizada a análise macroscópica e histológica das lesões. Técnicas de Microscopia Confocal a Laser serão utilizadas para marcação da estrutura 3D de componentes da matriz do biofilme. Todos os experimentos in vitro serão realizados em quadruplicada, em 3 ocasiões distintas (n=12). No estudo in vivo serão utilizados sete animais para cada condição experimental, exceto o grupo CNI+ (n = 3) e CNI- (n=3). O teste estatístico mais adequado será aplicado respeitando os pressupostos estabelecidos no delineamento experimental, considerando o nível de significância de 5%. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ABREU-PEREIRA, CESAR AUGUSTO; GORAYB-PEREIRA, ANA LUIZA; JORDA, CLAUDIA CAROLINA; PARO, CLARA BRAIT; BARBUGLI, PAULA ABOUD; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Zerumbone enhances the photodynamic effect against biofilms of fluconazole-resistant Candida albicans clinical isolates. Journal of Dentistry, v. 155, p. 10-pg., 2025-04-01. (24/00741-5, 13/07276-1)