Citotoxicidade de adesivos solvatados e não solvatados com diferentes concentrações de 2-hidroxietil-metacrilato sobre células pulpares

Resumo

O objetivo do presente estudo será avaliar a citotoxicidade de adesivos solvatados e não solvatados com diferentes quantidades de 2-hidroxietil-metacrilado (HEMA) sobre fibroblastos de polpa dental humana. Para isso, fibroblastos serão isolados da polpa dental de terceiros molares humanos hígidos. Sistemas adesivos experimentais, solvatados ou não, serão manipulados com diferentes concentrações de HEMA (0%; 10%; 20%; 30%, 40%). Fibroblastos (10 x 105 céls. por poço) serão semeados em placas de 6 poços, e incubados em estufa à 37°C e 5% CO2. Corpos-de-prova cilíndricos (5mm de diâmetro, 1mm de espessura) serão confeccionados e mantidos em contato com meio de cultura por 6 h. Após isso, o extrato obtido (meio de cultura + produtos liberados pelo sistema adesivo) será aplicado sobre as células e mantido por um período de 6 h. Decorrido este período, o extrato será removido, e a análise do metabolismo celular será realizada, utilizando o reagente metiltetrazolium (MTT). Além do MTT, serão realizadas medidas de citocinas e fatores de crescimento liberados pelas células no sobrenadante do meio de cultura. Serão realizadas também ensaios de western blotting para a proteína Akt, com o objetivo de identificar um possível fator regulador intracelular da ativação. Os dados serão tabulados e a análise estatística apropriada será realizada.