Expressão de microRNAs músculo-específicos na miogênese e durante o crescimento muscular do pacu (Piaractus mesopotamicus): estudos in vivo e in vitro

Resumo

O pacu (Piaractus mesopotamicus) apresenta excelentes características zootécnicas, como rápido crescimento e alta fecundidade, fatores que propiciam o sucesso de sua criação intensiva. Nos peixes, o músculo esquelético corresponde a maior parte da massa muscular, cujo crescimento ocorre por hipertrofia e/ou hiperplasia, processos regulados por várias moléculas sinalizadoras. Em mamíferos, tem sido sugerido que uma classe de pequenos RNAs não codificantes, conhecidos como microRNAs, são reguladores críticos da expressão de genes envolvidos com várias funções biológicas, sendo que os microRNAs miR-1, miR-133a, miR-133b e miR-206 estão envolvidos com a regulação transcricional de genes envolvidos com o crescimento do músculo esquelético. O objetivo desse trabalho é avaliar a expressão dos microRNAs miR-1, miR-133a, miR-133b, miR-206 e de seus mRNAs alvos no músculo esquelético do pacu, através de estudos in vivo e in vitro. Serão avaliados três períodos de desenvolvimento dos pacus (larval, juvenil e adulto). Os peixes serão mantidos e cultivados durante todo o experimento em caixas d'agua de 0,5 m³ dotadas de sistemas de recirculação de água. Serão retirados fragmentos da musculatura lateral branca profunda, próximo à cabeça. Tanto nos experimentos in vivo quanto nos in vitro, a expressão dos microRNAs e de seus alvos será analisada por Reação em Cadeia da Polimerase após Transcrição Reversa em Tempo Real (RT-qPCR). Para avaliação da função biológica dos microRNAs será realizada a técnica de silenciamento dessas moléculas, através da utilização de oligonucleotídeos antisense inibidores. Os dados obtidos serão submetidos a análises estatísticas adequadas. (AU)